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引物的设计方法
引物的设计方法 Creator System 简介
引物设计要点! 附加的独特序列
In-Fusion基因克隆配套元件包含pDNR-CMV和pDNR-Dual载体,这些载体是利用Cre-loxP位点将目的基因转移到受体
1) 确定载体末端的15个碱基序列。
载体上。这就可以使各种受体载体接受目的基因。
2) 引物的5末端附加上述的15个碱基。
供体载体
In-Fusion基因克隆的引物设计及目的DNA片段的扩
供体载体 启动子/特征 用 途
增,与常规PCR法是相同的。唯一的差异是载体末端
T7 启动子
序列与引物5末端附加序列具有15个同源碱基(右图)。 M13 正向测序引物 研究MCS上游T7 RNA聚合酶的引物/启动子在体内启动表达翻译的可能性
真核生物中通过内含子连接并在C末端添加标签
在In-Fusion用户手册中,展示出与pDNR-CMV载体 SacB 选择标记 在细菌中基因的C 末端添加6xHN 标签
6xHN C末端标签
和pDNR-Dual载体对应的引物序列。如果利用其它载
体进行克隆时,载体末端和引物末端应具有15个同源
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