热带兰花组培苗生产技术.pdf

热带兰花组培苗生产技术 何子育”①，黄永芳”，陈均隆2’ (1．海南省保亭热带作物研究所；2．海南省农垦总局科技处) 摘要介绍热带兰花组织培养、兰花种子无菌播种繁殖技术，以及有关室内组培生产的主要技术要求和应注意的问题。 关键词兰花组培苗组织培养原球体外植体 兰花美丽、高雅、芳香馥郁，是中国和世界著名的花卉，也是十分受人喜爱的花卉。曾有人形容“人乃万物之 灵，兰为万物之秀”。古人常以“君子、雅士、幽人”称颂兰花。兰花在国际市场上竞争激烈，行隋看好。海南是一 个天然温室，是发展兰花生产的宝地。近几年来，海南已经建立—些热带兰花生产基地，对兰花种苗需求较大。但 是大多数新的优质种苗都来自境外。因此发展新的优良兰花种苗生产是推动海南兰花产业化的重要环节。 兰花种苗靠自然分株繁殖增殖率低，速度慢，远远不能满足大规模生产的需要。运用兰花植物茎尖组织培养法 是快速大量生产兰花种苗的最好途径。海南省保亭热作所在20世纪80年代就开始研究兰花组织培养种苗技术，到 90年代已经开始工厂化生产。至今已经生产各种兰花种苗近60万株，对发展海南兰花产业做出了一定的贡献。本 文就兰花组培苗技术研究和生产实践，特别是兰花组培苗的室内生产技术及管理作如下总结和探讨。 1 几种热带兰花的组织培养 1．1石斛兰 500～1 石斛兰是兰科最大的属之一，有1 600多个原生种。石斛兰由于种类繁多，花形优美、花姿幽雅，花 色艳丽多彩，花期长，气味芳香，备受人们喜爱。目前通过杂交培育出来的切花品种和盆栽品种，其观赏价值更高。 一般大型热带兰花生产基地石斛兰品种占有很大的比例，对石斛兰种苗的需求!ii托,-k。保亭热作所曾经从马来西亚、 泰国等国家引进数十个石斛兰栽培品种进行组培繁殖。石斛兰类品种的生物学特性和生长习性等基本相同，采用的 组培方法如下。 1．1．1初生代培养 1．1．1．1采芽及表面消毒 组织培养采集的外植体应是生长旺盛、生活力强的植株及部位。而兰花_股茎尖生长为最活跃。石斛兰基部萌 生力较强，容易分生出新芽，可作为外植体材料。同时，石斛兰茎杆粗大，节间腋芽也较多、较容易取芽。腋芽也 可作外植体材料。取芽时—般选择生势旺盛、无病害、生长3～6cm的新芽，从与母株连接的部位切下，用肥皂水 洗刷后、再用自来水反复冲洗干净，剥去外层的叶鞘。表丽消毒步骤：先用75％的酒精浸1～2S，再用O．296的升汞 浸20min，并不时用手轻轻摇动。取出后剥去多余的东西，再放在无菌水中冲洗45次。灭菌后的外植体在超净 工作台上剥离出茎尖和切下茎杆上腋芽，接种到初生代培养基上，每个三角瓶中放1个外植体，然后移到培养间进 000 行培养。培养间的温度为26～28℃，在光照2lx，每日光照20～24h的条件下培养。 1．1．1．2初生代培养基：兰花培养基我们一般都采用Ms培养基，不过在不同培养阶段使用的分量有所不同。另外 MS+BA2 为了激活外植体生长分化，要加入适量的生长素等物质。适宜的初生代培养基配方为2／3 mg／L+蔗糖3％ +卡拉胶0．6％(pH5．4)。 石斛兰接种后一般都不会出现褐变。当接种后3～5d、个别品种如果在切口部位的培养基上出现褐变，要及时 将外植体转移到新的培养基上，以免影响成活率。当外植体培养20～30d后，茎尖切口周围组织膨大，随后开始逐 d 渐产生原球体。茎尖培养只要不污染，_般成活率都较高，成活率可达70％左右，长势也较旺盛。腋芽培养在20 后会生长出幼叶，这时如果取出在腋芽的基部切一刀制造创伤，伤口部位也会分生出原球体。原球体是兰花植物组 织培养产生特有的现象，是兰花组织培养快速增殖的一种特有形式，在培养初期阶段应让外植体快速形成并增殖原 球体，而不是要分化成苗。腋芽培养成活率低些，一般在30％50％。 1．1．2继代培养 外植体培养出来的原球体应该尽快进行增殖。在这一阶段的作法是使原球茎增殖与分化成苗同步进行，即在一 瓶苗里，原球体不断增殖，而同时