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生物标志物研究的回顾与思考 中国科学院水生生物研究所徐盈 有关持久性有机污染物(POPs)的环境影响及其生态安全评价，已成为当今环境科 学研究的前沿和最富活力的生长点之一．目前已有许多对环境中POPs进行定性定量分 析的国际标准化学分析方法，但是这些精确的仪器分析方法往往价格昂贵．费时费剂。 而且不能检测生物效应。环境保护的最终目标是保护人类赖以生存的生态系统，生物效 应理应是主要关注的目标。深入研究作为指示污染物危害生物信号的生物标志物．对于 揭示POPs的生态毒理学效应。生态风险评价及其危害早期预报具有重要的科学意义和 广泛应用前景。 生物标志物是指生物体内由于外源化合物的诱导所产生的可测量的变化，这些变化 包括细胞、生理生化成分、生物转化过程以及结构与功能方面的改变。因此，从广义上 讲，生物标志物是研究污染物与不同水平的生物组织的反应，并用所产生的毒性影响来 反映污染物的作用．虽然生物标志物指示污染物的危害可在不同水平上选择。但随着分 子一细胞一组织一个体一种群水平的生态相关性增加，而可检测的生物标志物却大大减 少。这是因为污染物对生态系统的影响需要经历一段较长的时问才能表现出来，如果等 到生态系统完全退化或功能全部丧失．那时的一切研究已经晚矣．因此，生物标志物研 究的立足点在于其早期预报(earlywarning)研究。在生态系统中．无论污染物对生 态系统的影响有多复杂或者最终的影响如何严重．其最早期的影响必然是从分子水平上 的作用开始的．然后逐一从分子、细胞、组织、个体、种群、群落以至整个生态系统各 个水平上反映出来．分子水平的变化是毒性影响的最早期信号，形态学观察到的变化所 显示的往往已经是毒性影响的后期结果．因此选择分子水平和不同层次上的生物，根据 不同污染物的毒性反应，开展利用生物标志物早期预报污染物危害影响的研究，具有最 重要的科学价值。 生物标志物分为暴露生物标志物、效应生物标志物和耐受性生物标志物。这三者在 实际应用中是相辅相成的。暴露标志物反映的是毒物在生物体内或引起生物效应的剂 量。通常．暴露生物标志物为母体化合物或者其代谢产物，需要采用化学分析的方法去 定性定量：效应标志物是指生物内能够导致危害的生化，生理方面的改变，酶功能的改 变或者污染物与DNA等生物大分子的相互作用。离体与活体生物试验方法是研究效应生 物标志物必不可少的试验模型。耐受性标志物是指生物个体固有的对污染物特定的敏感 反应，因此选择指示性生物或生物指示物进行试验对于生物标志物的灵敏度和特异性至 关重要。 二恶英和多氯联苯是国际上尤为关注的持久性有机污染物。由于它们在化学结构和 毒理学上的相似性。也统称为“二恶英类化合物”。这些污染物主要是通过与细胞液中Ah 受体相结合．然后进入细胞核。作用于DNA响应片断(DfcE)，激活基因的转录而诱导 CYPlAl，随之产生一系列生物学反应和毒性效应。利用7一乙氧基一异吩恶唑酮一脱乙基酶 来，己普遍应用子活体试验，离体细胞培养．室内模拟试验以及野外现场检测。研究结 果表明．CYPlAl的诱导是灵敏指示=恶英类毒性效应的生物标志物，具有十分广阔的应 用前景。 然而，在实际应用中，生物标志物具有它的局限性。生物体内具有自身修复机制， 这增加了生物试验出现假阴性的几率。多数生物标志物缺乏特异性，因而也会增加生物 试验出现假阳性的几率。生物标志物还存在着物种间的差异和个体问的差异，这些因素 会影响试验的灵敏度和重现性。再者，生物标志物反映的是整个试验体系的综合结果． 因而，试验结果特别容易受到多种因素的干扰而出现偏差。因此，如何保证生物标志物 的有效性一直是关于生物标志物研究的核心问题。根据近十多年来生物标志物研究的实 践，我们体会到：1)生物标志物与污染物的毒性机制密切相关，应当根据不同污染物 的作用机制去正确判断和选择有效的生物标志物；2)污染物对生物机体的作用存在着 组织和器官的靶位差异；不同物种间，相同物种不同生命时期间的差异，需要选择敏感 物种和敏感生命时期，应用多靶位生物标志物进行实验，才能全面反映污染物对生物的 毒性影响。3)必须建立生物试验可靠的质量保证与质量控制(QAQc)体系。严格控制 从受试生物的饲养到试验的每一个环节。4)必须利用化学分析定性定量生物体内污染 物的暴露，以建立定量的剂效关系和时效关系；5)离体试验与活体试验应该有机结合； 6)开展不同试验物种的生物标志物试验，从不同生物层次和生态尺度上去揭示污染物 的毒性影响。