§5.1 DNA的粗提取与鉴定 一、基础知识 (一)提取DNA的方法 1.提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子 2.提取DNA的基本思路 提取DNA,去除其他成分 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等 在物理和化学性质方面的差异 ⑴ DNA的溶解性 DNA和蛋白质等成分 在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点, 选择适当的盐浓度 就能使DNA充分溶解, 而使杂质沉淀; 或者让其他成分溶解, DNA析出 3.DNA等大分子的理化性质 ⑵ DNA不溶于酒精溶液 ⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 DNA不溶于酒精溶液, 但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 将DNA与蛋白质进一步分离。 ⑵ DNA不溶于酒精溶液 ⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ① 蛋白酶——水解蛋白质, 对DNA没有影响 ② 高 温——大多数蛋白质不能忍受60~80℃ 而DNA在80℃以上才会变性 ③ 洗涤剂——溶解细胞膜,去除脂质和蛋白质 但对DNA没有影响 试剂: (二)DNA的鉴定 条件: 二苯胺 沸水浴条件下,DNA遇二苯胺被染成蓝色 沸水浴 现象: (一)实验材料的选取 (二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 (三)除去滤液中的杂质(纯化) (四) DNA的析
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