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朊 粒山东大学医学院 赵蔚明 教授 * 正常宿主细胞基因编码的、构象异常的朊蛋白（无核酸成分）。* 是人和动物传染性海绵状脑病（TSE）的病原体。 朊粒耐高温，加热到360℃仍有感染力，植物油的沸点（160℃一170℃）不足以灭活病原，疯牛病的脑组织匀浆，经134℃～ 138℃高温维持1小时后，对实验动物仍有感染力。且还耐甲醛、耐强碱，疯牛病的脑组织能耐受 1mol／L和2mol/L NaOH达2小时之久 传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathy, TSE） * 动物TSE，如： 羊瘙痒病（scrapie of sheep and goat） 牛海绵状脑病（bovine spongiform encephalopathy, BSE）——疯牛病 * 人类TSE，如： 库鲁病（kuru disease） 克－雅病变种（variant CJD, v-CJD） PrPC 与 PrPSC * 正常情况下，细胞PrP基因编码产生细胞朊蛋白（cellular prion protein, PrPC）， PrPC以α螺旋为主，对蛋白酶K敏感，无致病性。 * 某些条件下，PrPC构型发生异常变化（以 β折叠为主）形成致病的PrPSc（羊瘙痒病朊蛋白，scrapie prion protein），对蛋白酶K有抗性，具有致病性与传染性。 PrPC 与 PrPSC * 正常宿主细胞具有编码产生朊蛋白的基因，人类PrP基因位于第20号染色体，小鼠PrP基因位于第2号染色体。 * PrPC与PrPSc由同一染色体基因编码，其氨基酸序列完全一致（253～254个氨基酸），根本的差别在于它们空间构象上的差异。 PrPC与PrPSc的主要区别 抵 抗 力 Prion对理化因素有很强的抵抗力 * 抵抗蛋白酶K的消化作用； * 标准的高压蒸气灭菌（121.3℃,20 min）不能破坏Prion，需高压蒸气灭菌134℃、≥2 h，才能使其失去传染性。 * 对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性。 人类Prion病的传播途径 * 传染性（TSE）： 如库鲁病、克雅病变种 多种途径传播（消化道、血液、神经及医源性） * 遗传性： 如家族性克雅病，与遗传有关（PrP基因突变） * 散发性： 如散发性克雅病，传播途径尚不明 人和动物的Prion病 库鲁病（Kuru disease） 疯牛病，与病牛接触或进食病牛肉是人v-CJD最主要的发病原因。 病原学确诊——检测致病因子PrPSc *免疫组化法：标本先用蛋白酶K处理破坏PrPC，然后再用PrP单克隆抗体或多克隆抗体检测对蛋白酶K有抗性的PrPSc。 *Western blotting：目前国际上诊断Prion病最常用的有效方法。先用蛋白酶K处理组织标本，电泳后转印至硝酸纤维膜，再用PrP单克隆抗体或多克隆抗体检测PrPSc。 防治原则 * 医源性Prion病的预防 对污染物必须彻底灭菌：1 mol/L NaOH处理1 h，再高压灭菌134℃，2 h。 * BSE及vCJD的预防 禁止用牛羊等反刍动物的骨肉粉作为饲料添加剂喂养牛等反刍动物。对从有BSE的国家进口的牛或牛制品，必须严格地进行特殊检疫。 * * 第35章 朊粒（prion） 1982年，美国学者Prusiner提出用proteinaceous infection particle的字头组成Prion一词，作为传染性海绵状脑病 (transmissible spongiform encephalopathy，TSE) 的病原体。 Prusiner因此荣获1997年Nobel医学奖。1996年底美国《Nature》评出最有影响的十大科研成果中，“成功发现PrPsc是疯牛病和人CJD的病因”为第四条。 Prion 本质：传染性蛋白因子，主要成分是一种 蛋白酶抗性蛋白（PrP） 生物学特性： 可滤过性，增殖非常缓慢； 与已知病毒特征明显不同； 不具有病毒结构，未检出核酸； 对福尔马林、蛋白酶、加热、电离辐射、紫外线抵抗力强； 人类PrP基因：位于第20号染色体的短臂上，可编码两种结构相同而分子构型不同的PrP: PrPc：细胞阮蛋白 PrPsc：羊瘙痒病软蛋白 有致病性与传染性 无 致病性 感染动物 正常及感染动物 存在 抗性 不可溶 敏感 可溶 对蛋白酶K的抗性 在非变性去污剂中 β-折叠占50％，ɑ-螺旋占20％ ɑ-螺旋占40％，β-折叠仅占3％