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(四川 学案)2017学年四川省高二生物学案:专题3课题1(第2课时)(人教版选修一)
使用说明与学法指导
掌握基础知识植物组织培养的基本过程和影响因素后理解实验操作过程。
知识准备
基础知识植物组织培养的基本过程和影响因素。
教材助读
一、实验操作流程
1、制备MS培养基
A.配制各种母液:配制母液时, 元素浓缩10倍, 元素浓缩100倍, 以及用量较小的有机物一般可按 的质量浓度单独配制成母液。
B.配制磁头基的步骤是
C.灭菌的方法:
2、外植体消毒:先用 消毒,再用 消毒,最后用无菌水清洗。
3、接种:所有的接种操作都必须在 旁进行,对接种工具在使用前和使用后都要进行 灭菌。
4、培养:培养期间应定期消毒,培养温度控制在 ,并且每日用日光灯光照 。
5、移栽:先在培养间生长几日,再移栽到土壤中。
6、栽培
二、无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键
①植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。
②无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果;另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。
③对接种操作中污染情况的分析:接种3~4 d后,在接种操作中被杂菌污染的培养物会表现出被污染的现象。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。真菌污染可能是植物材料灭菌不当。
④妥善处理被污染的培养物:操作后常出现培养物被污染的情况。一旦发现培养材料被污染,特别是真菌性污染,一定不要打开培养瓶。应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶,进行清洗。
⑤有毒药品的用后处理:外植体灭菌用过的有毒药品要妥善处理(如氯化汞等),以免引起环境污染。
三、设置对照实验和重复组
通过设置重复组和对照组可以选出最佳的实验材料、最好的培养基配方、找出实验失败的原因。如设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作是否合格,有没有被杂菌污染。
不同组的同学设置不同的激素浓度,相互比较植物生长的速度。
预习自测题
1、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的( )
A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素
2、下列哪组符合菊花组织培养的基本步骤( )
A.制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培
B.制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽
C.制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽
D.制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培
我的疑问
学始于疑
植物组织培养的流程是怎样的呢?
课内探究
质疑探究
归纳总结
植物组织培养过程中,消毒(无菌技术)——成功的关键。
知识网络图
当堂检测
1、下列关于影响植物组织培养因素的说法,正确的是( )
A.不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同
B.在植物组织培养中,培养基中必须添加植物激素
C.植物激素中,生长素和细胞分裂素的作用是相互独立的
D.pH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要
2、关于植物组织培养的内容,以下说法错误的是( )
A.一般来说容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养
B.对菊花茎段进行组织培养,不加植物激素也能成功
C.接种后的锥形瓶放入无菌箱中,给予适宜的温度和光照即可
D.移栽生根的试管苗之前,先打开瓶口,让试管苗在培养间生长几日
课后反思 请将学习总结写在下面
课后训练
1、下图表示基因型为AaBb水稻的花药通过无菌操作,接入试管后,在一定条件下形成试管苗的培育过程。下列相关叙述错误的是( )
A.愈伤组织是花粉细胞通过有丝分裂后形成的不规则的细胞团B.在愈伤组织的形成中,必须从培养基中获得水、无机盐和小分子有机物等营养物质C.为促进花粉细胞分裂生长,在培养基中应加入适宜浓度的生长素等
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