磁场富集的急性白血病免疫传感分型技术的研究.pdfVIP

磁场富集的急性自血病免疫传感分型技术的研究 王攫，黄明民，沈国励、俞汝勤 (湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室， 长沙410082) 急性白血病的免疫分型即利用特定单克隆抗体识别白血病细胞分化抗原的一种临 床诊断手段，对于临床急性白血病的准确诊断、治疗方案的选择、预后的判断以及病因 的探索等具有十分重要的意义。然而，临床上采用的主要急性白血病免疫分型方法普遍 表型速度慢、定量能力低、操作复杂、仪器昂贵且需要专业技能，目前尚只能在少数实 验室应用。从而开发一些简便、廉价、定量准确且易于临床推广的免疫传感分型技术是 一件很有价值的工作。 本文基于磁场免疫富集原理并结合高灵敏的压电效应。建立了一种高效、灵敏、自 动化的压电免疫传感技术，用于急性白血病的快速免疫分型。采用化学固相沉淀方法制 备ZnFe204颗粒，进而通过氮水催化正硅酸乙酯水解以共聚包覆Si02壳层，制得亚微米 级核．壳结构磁性微球，经表面氨基硅烷化后，用于交联白血病各亚型(系)细胞特异的 单抗，并以流动注射方式检获样中自血病细胞分化抗原，然后借助外加磁场将之富集于 压电探针表面进行表型分析。研究结果表明：以Si02包覆XnFe204颗粒制得的顺磁性核． 壳型颗粒，具有比表面积大、顺磁性强、悬浮稳定性好等优良理化性能，经表面功能化 后用作急性白血病各亚型(系)细胞特异单抗的载体，获得了较高的蛋白偶联容量：实 验中，借助外加磁场富集并佐以流动注射形式，实现了对急性白血病细胞的高效免疫识 别与自动化检测。该传感表型系统能高灵敏地区分急性淋巴系和髓系白血病细胞，并确 cells 定相应的自血病亚型(系)，可定量测定浓度数量级低至～103rnL．‘的白细胞。与临 床常用免疫分型方法比较，所构建的急性白血病传感分型系统兼具免疫分离与富集功能， 能在免分离纯化样品的条件下直接进行免疫表型分析．具有表型敏感度高、操作简便、 成本低、数据输出实时、能进行自动化批量样品的表型鉴定与定量检测等优点，并弥补 了单纯FAB分型的直观诊断所掺杂的主观性、重复性差等缺点，为临床急性白血病的诊 断、治疗方案的确定、预后判断等提供了一种新手段。 l Table of for resultsthe Comparison leukocyticspecimens immunophenotyping with betweenthe method clinicallydiagnosed QCM phenotypes developedsensing andthe immunological assay(mA) enzyme-labeling 8 Number b Lineages TheⅢAmethod The m讪odb QCM sensing T-AI工B．ALLG-AMLM-AML2-ALL B．AL乙G．AMLM．AML G．AML 9 2 7 l 0 l 8 2 M-AML11 2 l lO l 2 2 l T．ALL 6 5