纳米二氧化钛对抗体中标记的辣根过氧化酶催化作用的初步探索.pdfVIP

第lO届全国有机电化学与工业学术会议论文集 纳米二氧化钛对抗体中标记的辣根过氧化酶催化作用的初步探索 朱亚琦，武海，马洁。 (首都师范大学化学系北京100037) 前言：近年来电化学免疫传感器飞速发展，它具有免疫反应的高选择性和电化学分析的高灵敏性，广泛应用于医疗生物等领 域．然而这种免疫反应没有电信号发生，大都通过酶标氧化还原蛋白而产生电流信号．但由于辣根过氧化酶(HRP)的氧化 还原活性中心深埋在酶分子内部，其与屯极表面闻的距离超过了电子能以足够快的速率进行转移的距离，在通常情况下难 以与电极之间进行直接电子转移，因此，为了酶在电极表面发生可逆或准可逆的直接电子转移反应，探索合适的电极材料 和修饰方法是非常重要的IMl。 近20年来，半导体纳米二氧化钛以其廉价无毒、抗光腐蚀、催化活性高、氧化能力强、稳定性好等优势，受到人们的广泛 关注131．而Ti02纳米管是Ti02的又一种形式，由于纳米管比纳米膜具有更大的比表面积，因而具有较高的吸附能力。特别 光催化性能；特别是若能在管中填充更小的无机、有机、金属或磁性纳米级颗粒形成一维复合纳米材料，将会大大改善Ti02 的光电、电磁、催化及抗菌等性能．本文分别研究了辣根过氧化酶、标记在抗体中的辣根过氧化酶在修饰Y-氧化钛纳米 管的玻碳电极表面的直接电化学行为，二氧化钛纳米管能够有效的促进HRP的直接电子传递，固定在TiOgGC电极表面 的HRP能保持其对H20：还原的生物电催化活性，为抗原抗体的免疫反应信号的选择奠定了基础． ‘ 关键词；二氧化钛纳米管、辣根过氧化酶标记抗体、直接电化学行为 1 实验部分 负载Ti02纳米管／HRP电极的制备：将适量本实验室采用AAO模板法制各的Ti02纳米管，超声分散 于无水乙醇中。用微量移液器吸取一定量的Ti02溶液分散在玻碳电极表面，室温下晾干，此时在电极表 于4C静置过夜，取出并用蒸馏水洗涤。此时HRP吸附予Ti02涂层上，然后即可进行各种电化学实验。 (以下实验电位均相对饱和甘汞电极) 2结果与讨论 2．1 HRP在纳米Ti02管上的直接电化学行为 图l所示是本实验室采用AAO模板法制备的Ti02纳米管。纳米管的直径为100nm。 Ti02纳米管／HRP修饰电极和Ti02纳米管／HRP标记抗 体修饰电极在磷酸盐缓冲溶液(pH=7．0)中测得的CV曲线 为图2所示。在．0．2mV附近均观察到一对氧化还原峰。峰 的形状基本对称而且氧化和还原峰高大致相等。而只含 HRP的电极峰电流很小。所以Ti02纳米管能促进HRP的 电活性中心与电极之间进行电子交换。图3是Ti02纳米管 小RP修饰电极在O．ImoFL PBS(pH=7．o)O不同扫描速率时 的循环伏安曲线。从图中可以看出，HRP直接电子转移反 应的氧化与还原峰电流几乎相等，即i棚辨=l，并且氧化还 Fig．1．TEMilllageofmcn猢tubcs内m他d。 9 。 byAAo 曼竺詈霉当皇兰茎量苎：之问有线性关系，说明整个电极 一。 过程是受表面过程控制的。 ● 责任作者：马洁，女，1956年生，硕士，研究生最师，E-mail：jiema@public．bta．net．cn 北京市白然科学基金(NO．6052002)资助项目 247 第lO届全国有机电化擘与工业学术会议论文集 Ti02纳米管能有效地促进HRP的直接电子转移除了与其具有小的几何尺寸及特殊的电子结构和导电 性能有关以外，更重要的可能是蛋白可以吸附于氧化物膜上以及Ti原子与蛋白分子特殊的螯合作用，使 得蛋白质分子能以一定的取向存在于电极表面，有利于蛋白与电极之间电子交换反应的发生。