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2017-03-26 发布于四川
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TILLING技术及其应用

细胞生物学杂志 Chinese Joumal ofCell Biology 2007 , 29: 41-46 TILLING 技术及其应用孙洁崔海瑞* 志 (浙江大学原子核农业科学研究所，杭州1310029) 志杂摘要定向诱导基因纽局部突变 (targeting induced locallesions in genornes , TILLING)可快学速、有效地鉴定和定向筛选突变，是一种全新的反向遗传学技术。现对TILLING 的技术流程、核杂心与特点，及其在突变研究、反向遗传学及功能基因组学、 SNP 检测、资源创新与分析以及作物物遗传改良等方面的应用进行了综述。学生关键词 TILLING; 反向遗传学; SNP; 资源评价;遗传改良物胞生在现今基因组时代，揭示基因及蛋白质的功能越标基因设计特异性引物，分别进行荧光染料标记和细来越需要反向遗传学的帮助。为克服常用反向遗传 PCR 扩增; (7)扩增产物变性、追火，获得野生型和胞学手段的不足和某些限制，科学家们发展了定向诱导突变型的异源双链核酸分子;(8)用特异性识别并切割细碱基错配的核酸内切酶酶切异源双链核酸分子; (9)采基因组局部突变(targeting induced local lesion in 志 genornes , TILLING)技术I 山。它将诱发产生点突变用变性聚丙烯酷胶凝胶电泳(DPAGE)分离和双色检杂的化学诱变方法与PCR 筛选技术和高通量检测方法测，以标准图像处理程序分析电泳图像获得突变; (1 0) 有效结合，是一种全新的高通量的反向遗传学和功能采取相同的方法从突变池中筛选突变个体; (11)突变学基因组学研究li法[3-61 。自从2000 年有关拟南芥个体PCR 产物的测序验证; (1 2)突变体的表型鉴定。物