小论文型叶绿素的分离和提取.docxVIP

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小论文型叶绿素的分离和提取

小论文型教案:叶绿素的分离与提取 实验设计[6]:1.情境引入,展示目标:⑴请同学们思考一个小小的叶绿体为什么能利用光能,把CO2和H2O合成有机物呢?(与叶绿体色素吸收和转化光能有关)。 ⑵叶绿体色素在叶绿体中是怎样分布的?可出示教材99页图片。 ⑶叶绿体色素能稳定地分布于膜中,说明它的溶解性有何特点? ⑷请同学们思考为什么同是一片叶子,夏季时翠绿醉人,而秋季却金黄斑斓?叶绿体中到底有哪些色素呢?2.根据实验教学目标,师生共同设计实验:(可提供步骤和不提供步骤)⑴提取叶绿体色素应选用植物的哪一部分作材料?⑵根据叶绿体色素溶解性应选用哪种溶剂提取?⑶叶绿体色素中含有的镁离子有什么特点?采取怎样的措施防止叶绿体色素的破坏?⑷提取出的叶绿体色素混合滤液中,含有各种在有机溶剂中溶解度不同的色素,怎样将各种色素分开?为了使学生能准确、顺利完成自主性实验操作,在学生实验前教师可进行演示实验或放映有关实验过程的录相。3.鼓励学生独立操作,获得预期实验结果4.引导学生分析实验现象,得出正确的探究结论:⑴让学生准确地描述出滤纸条从上到下的各条色素带的色泽;⑵指导学生阅读有关课文,并说出滤纸条从上到下的各种色素的名称及含量;⑶向学生阐明各种叶绿体色素的吸收光谱……实验目的:叶绿素的提取与分离探究叶绿素中含有几种色素探究叶绿素提取的适宜条件(提取剂、温度、料液比、超声波)优化叶绿素提取和分离过程实验原理:叶绿体色素又称光合色素,在高等植物中可分为叶绿素和类胡萝卜素两大类,前者包括叶绿素 a(蓝绿色)和叶绿素 b(黄绿色),后者包括胡萝卜素(橙色)和叶黄素(黄色),它 们与类囊体膜上的蛋白质结合形成色素蛋白复合体,不溶于水,易溶于酯,因此可用丙酮、乙醇、石油醚等有机溶剂进行提取。由于纸对光合色素中各种色素分子的吸附程度不同,以及这些色素分子在溶剂中溶解度也有差异,以致溶剂带动色素分子向四周移动时,各种色素分子沿纸扩散的速度也就不同,使混合色素分离,出现不同颜色的条带。实验器材:剪刀、试管(25ml)、试管架、试管夹、大小烧杯、小量筒、滴管、玻璃漏斗、水浴锅、盖玻片、毛细吸管实验试剂:菠菜(叶绿素含量高、叶汁接近中性、叶绿素酶活性低、纤维素少)无水乙醇、二氧化硅(石英砂)、碳酸钙、层析液(石油醚+丙酮+苯混合而成)实验步骤:提取1:(1)取菠菜或其他植物新鲜叶片5g,洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研。(2)在研钵中加入少量碳酸钙和约 3-5mL 丙酮后,研磨成匀浆,研磨过程中根据情况加入一定量的丙酮以利于研磨,匀浆用多层纱布过滤到试管中。(3)在残渣中再加入3-5mL丙酮,研磨过滤,共得深绿色溶液近10mL提取2:称取1g绿色叶片,剪碎放入试管,加入2ml的无水乙醇,把试管置于沸水中水浴加热 2-3分钟,当试管中的液体呈深绿色时,取出试管,冷却待用。分离1:圆形(1)先用条滤纸(2cm×4cm)沿长度方向卷成一个紧实的纸芯。取一张圆形层析滤纸(直径,略大于培养皿直径),在其中心位置钻一个纸芯粗度的圆形小孔(滤纸不能折叠),将卷好的纸芯一端插入孔内少许,并剪去纸芯上端多余部分,使纸芯上端与滤纸恰好平齐,下端长约 1.5cm(与培养皿盖高度同)。(2)把个这带纸芯的圆形滤纸,平放在干净的培养皿上,用毛细吸管吸取少量叶绿体色素的丙酮提取液,小心地滴入纸芯上端7~10 滴。注意:一定要在色素斑点稍风干后,再滴入另一滴,而且液滴不能污染滤纸。(3)向培养皿中倒入适量(约为培养皿高度的 1/3 左右)层析液,使纸芯下端浸入其中,并立即盖上培养皿,数分钟后,就可见到滤纸上出现四或五个颜色不同的同心环,并逐渐扩大。(4)当层析液扩散接近滤纸边缘时,取出滤纸,即可看到分离的各种色素,用笔铅标出各种色素的位置和名称,并绘简图示之或拍摄图片。分离2:滤纸条(1)将滤纸剪成滤纸条(9cm×3cm),用滴管吸取丙酮叶绿体色素提取液,沿纸条的长度方向涂在纸条的一边(距边约1cm),使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内,风干后,再重复操作数次。 (2) 在层析缸中加入适量的层析液,将滤纸条带有色素的一端插入层析缸中,使滤纸条下端浸入推动剂中。迅速盖好层析缸盖。此时,层析液借毛细管引力顺滤纸条向上扩散,并把叶绿体色素向上推动,不久即可看到各种色素的条带。 (3) 当层析液前沿接近滤纸边缘时,取出滤纸,风干,即可看到分离的各种色素:叶绿素a为蓝绿色,叶绿素b为黄绿色,叶黄素为鲜黄色,胡萝卜素为橙黄色。用铅笔标出各种色素的位置和名称。实验注意事项:(1)研磨叶片要充分,否则提取的叶绿体色素溶液浓度稀,现象不明显。 (2)纸层析时,纸芯一定要卷实,分离色素用的圆形滤纸在中心打的小圆孔周围必须整齐,否则分离的色素不是一个同心圆。 (3)色素的提取、分层均应在弱光或暗室内绿光下进行,以防光破

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