吡喹酮治疗血吸虫肝纤维化效果及细胞因子变化的临床观察.docVIP

吡喹酮治疗血吸虫肝纤维化效果及细胞因子变化的临床观察 　　摘要：目的 研究吡喹酮治疗血吸虫肝纤维化前后血清IFN-Y、lL-4、IL-5、IL-10水平及肝纤维化的变化。方法 用ELISA双抗体夹心法检测吡喹酮治疗前后IFN-Y、lL-4、IL-5、IL-10水平，行肝脏彩超观察吡喹酮治疗肝纤维化的效果。结果 治疗前患者血清IFN-Y、lL-4、IL-5、IL-10 水平较正常组显著下降（P0.01），治疗后IFN-Y、IL-4、IL-5、IL-10水平较治疗前显著增加（P0.01），治疗后患者肝纤维化有部分好转。结论 治疗前患者免疫应答水平明显下降，治疗后患者免疫应答水平明显回复，肝纤维化可部分好转。 　　关键词：吡喹酮；细胞因子；血吸虫病；肝纤维化 　　人类感染血吸虫后，沉积于肝脏的虫卵引发慢性肉芽肿反应并导致渐重的肝纤维化，在形成肝纤维化的免疫应答过程中，TH1类细胞因子和TH2类细胞因子起着重要的作用。吡喹酮是治疗血吸虫肝纤维化的首选化疗药物，本文研究吡喹酮治疗对血吸虫肝纤维化患者免疫应答的影响，就治疗前后细胞因子的应答水平及肝纤维化治疗效果进行了分析。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 选择自2013年5月～2015年5月到我院就诊，初次诊断为慢性血吸虫病（符合血吸虫病诊断标准WS 261-2006），且肝脏彩超示血吸虫肝纤维化（II级）患者32例，其中男性19例，女性13例，年龄12～63岁，平均38岁；另随机选30例健康者对照，其中男性18例，女性12例，年龄11～65岁，平均37岁，均采血备用。 　　1.2方法 感染组予以吡喹酮（剂量60 mg/kg，分2 d口服，体重60 kg患者总剂量为3600 mg，仍分2 d口服）治疗，治疗2个月后再次采血。 　　1.3实验方法 取患者及健康者血离心，取上清于1.5 mL离心管中-70℃超低温冰箱保存备用。IFN-Y、IL-4、IL-5、IL-10检测试剂盒 购 自 北 京 达 科 为 生 物 技 术 有 限 公 司 ，参照试剂说明书进行，4种细胞因子检测的最低灵敏度均为15.6 ng/L，用ABC-ELISA双抗体夹心法检测细胞因子，从标准曲线上查找对应浓度，确定样品含量。并且半年后复查肝脏彩超了解肝纤维化程度。 　　2 结果 　　2.1吡喹酮治疗肝纤维化效果 32例患者经标准吡喹酮治疗后，有3例患者复查肝脏彩超示肝脏形态正常，有8例患者示肝纤维化I级，有21例患者肝脏彩超无明显变化，提示吡喹酮治疗可部分逆转血吸虫肝纤维化。 　　2.2血清IFN-Y、Ll-4、IL-5、IL-10 检测结果 与正常组比较，感染组治疗前所有细胞因子水平均显著下降（P0.01），且以IFN-Y、IL-10下降更为明显；吡喹酮治疗后较治疗前所有细胞因子水平均显著升高，且以IFN-Y、lL-10上升更为明显，见表1。 　　3 讨论 　　宿主感染血吸虫后，机体持续处于对血吸虫虫卵抗原的免疫应答状态，导致肝星状细胞异常激活转化为肌成纤维细胞并大量增殖，产生大量的细胞外基质（ECM），超过了机体的降解能力，致使ECM在肝内过量沉积而导致肝纤维化，Thl型与Th2型免疫反应应答及失衡起着重要作用。Th1类免疫应答产生细胞免疫，其细胞因子主要包括IFN-Y、IL-12、、IL-2、IL-18等，Th 2类免疫应答产生体液免疫，其细胞因子主要包括IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等，Th1型细胞因子与Th 2型细胞因子有相互拮抗作用。许多研究证实，IFN-Y是一种很强的抗纤维化因子，其显著抑制细胞外基质（ECM）的合成，也可明显抑制重要的基质产生细胞肝储脂细胞、HSC的激活.抑制α-肌动蛋白（α.SMA）及其mRNA的表达[1]；lL-4、IL-5、IL-10均属TH2型细胞因子，其中lL-4、IL-5的作用较明确，可促进肝纤维化；IL-10目前其作用不一，有些学者认为其具有双向调节作用[2]。 　　国内外学者认为，血吸虫肝纤维化是可以逆转的，而肝硬化是不可逆转的，应用吡喹酮治疗血吸虫肝纤维化，可降低肝纤维化的程度，本研究支持了该观点[3]。 　　在小鼠感染血吸虫模型提示， 在日本血吸虫感染初期可能主要引起一个以产生IFN-Y等为主的Th1优势应答， 而当虫体成熟排卵后，又诱导出一个以产生IL-4为主的Th2 优势应答， 并抑制Th1反应， 使虫卵肉芽肿炎症反应逐渐减弱转为慢性血吸虫病[4]。但本研究显示，感染组治疗前所有细胞因子水平均下降，考虑与长期反复血吸虫感染导致免疫下调有关[5]。且以IFN-Y、IL-10下降最为明显，可能与两者为抗纤维化因子，而疗前患者以向肝纤维化发展有关。吡喹酮治疗后所有细胞因子水平均升高，考虑是因为下调的免疫应答