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复方鱼腥草滴丸质量标准研究 　　摘要：目的 建立复方鱼腥草滴丸的质量标准。方法 采用TLC法对处方中鱼腥草、黄芩进行定性鉴别，采用HPLC法测定黄芩中黄芩苷的含量。结果 在TLC中均能检出鱼腥草，黄芩，且斑点清晰，专属性强，阴性对照无干扰；黄芩苷在0.10255～2.04491μg内呈良好线性关系（r=0.9999），平均回收率为98.94%（n=6），RSD=1.3%。结论 所建立的方法准确、可靠、专属性强，可以用于该制剂的质量控制。 　　关键词：复方鱼腥草滴丸；TLC法；鱼腥草；黄芩；HPLC法；黄芩苷 　　复方鱼腥草滴丸由鱼腥草、黄芩、板蓝根、连翘和金银花五味药材制备而成，具有清热解毒之功效。用于外感风热所致的急喉痹，急乳蛾，症见咽部红肿、咽痛；急性咽炎，急性扁桃体炎见上述症候者[1]。原标准TLC方法重现性、稳定性较差，含量测定方法前处理复杂，重现性差，为了更好地提高产品质量的可控性，本文对鱼腥草、黄芩进行了薄层色谱鉴别，并采用高效液相色谱法对方中黄芩的活性成分黄芩苷进行含量测定，为该制剂生产提供了质量控制依据。 　　1 仪器与试药 　　岛津LC-20AD高效液相色谱仪，Labsolution工作站，PDA检测器。 　　黄芩苷对照品（批号为110715-201117），鱼腥草对照药材（批号为121046-200403）均购自中国食品药品检定研究院。复方鱼腥草滴丸及处方中5味药材由江西天施康中药股份有限公司提供。硅胶G板（青岛海洋化工厂分厂），水为超纯水，甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1鱼腥草的薄层鉴别 取本品5g，加水20ml，加热回流30min，放冷，离心，取上清液，用氨水调节pH值11～12，用乙酸乙酯振摇提取2次，30ml/次，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml溶解，作为样品溶液。另取鱼腥草对照药材0.5g，加水50ml，煎煮30min，滤过，浓缩滤液至约20ml，用氨水调节pH值11～12，同法制成对照药材溶液。取缺鱼腥草药材的阴性样品5g，按样品溶液制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，分别吸取样品溶液10μl、对照溶液5μl，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（4∶3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热约1min，置紫外光灯（365nm）下检视。结果样品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色荧光主斑点。阴性对照液无干扰，见图1。 　　2.2黄芩的薄层鉴别 取本品2g，加温水20ml，超声提取10min，用稀盐酸调节pH值1.5～2.0，80℃保温1h，离心，弃去上清液，沉淀用水洗涤2次，残渣加2ml甲醇使溶解，作为样品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。取缺黄芩药材的阴性样品2g，按样品溶液制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，分别吸取样品溶液1μl、对照溶液5μl，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。结果样品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照液无干扰，见图2。 　　2.3含量测定 　　2.3.1色谱条件 色谱柱为Ultimate XB-C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-水-磷酸（45：55：0.2）；流速：1.0ml/min；检测波长：315nm，进样量：10μl。 　　2.3.2对照溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。 　　2.3.3样品溶液的制备 取本品，研碎，取约0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加70%乙醇60ml，超声提取30min，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀，离心，取上清液，作为样品溶液。 　　2.3.4阴性对照溶液的制备 取缺黄芩的模拟制剂约0.2g，按样品溶液的制备方法制备，即得。 　　2.3.5方法专属性考察 按上述色谱条件分别进样供试品溶液、黄芩苷对照品和缺黄芩阴性对照溶液，结果阴性对照无干扰（见图3）。 　　2.3.6标准曲线的制备 分别精密吸取对照品溶液（其浓度为0.204491mg/ml）1ml、5ml，置10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液Ⅰ、Ⅱ；再分别精密吸取对照品溶液Ⅰ、Ⅱ各5μl、10μl、20μl，注入液相色谱仪，记录峰面积。以对照品进样量为横坐标X，峰面积积分值为纵坐标Y，得回归方程：Y=3148105.2462x-26698.8788