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从石蜡包埋组织样品中高效提取DNA
从石蜡包埋组织样品中高效提取DNA
简介
| Liver | Kidney | | Heart | Lung |
近 10 年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类
疾病研究的诸多领域,为了解病理状态下基因组DNA 的变化积
累了新资料。石蜡包埋组织是生物样品保存的经典方法。医院病
理科档案中积存的大量石蜡包埋组织,是一个可靠的分子生物学
研究的材料来源。石蜡包埋组织DNA 的提取扩展了分子生物学
技术在临床上的应用范围。若能成功地从蜡块中提取出高质量的
DNA,就可以满足某些肿瘤分子生物学研究的需要,结束了DNA
2. 高温处理去修饰DNA
研究依赖于新鲜或冰冻组织和细胞的历史,而且可以广泛地应用
于大宗病例的回顾性研究,对肿瘤发生的分子机制的探讨,诊断 取 5mg 新鲜的鸡肝样品和石蜡包埋组织鸡肝样品(1 年),
o
与鉴别诊断研究和患者预后评估等方面均具有重要价值。从石蜡 按HiPure FFPE DNA Kit 进行操作,然后在90 C 高温处理
包埋组织中提取高产量和高纯度的DNA 是分子生物学的难点。 时,选择不同的处理时间(0min, 10min, 30 min, 60min),
组织样品经甲醛固定后,蛋白质与蛋白质,蛋白质与DNA 发生 以证明高温处理对DNA 完整性和得率的影响,其结果以下。
o
了严重的交联和包裹,DNA 很难从组织中完全释放出来。甲醛 由电泳可知,在新鲜样品中,90 C 高温处理 0-60min 并不
的固定还会引起基因组的片段化和修饰。除固定过程带来的损伤 会影响到基因组DNA 完整性和产量;但在石蜡包埋组织中,
o
外,其它浸蜡过程,包埋过程,以及贮藏过程都会对DNA 带来 90 C 高温30-60 分钟可明显提高产量,但不会影响到 DNA
损伤。Magen 公司的HiPure FFPE DNA Kit (D3126-02)采 的完整性。
用硅胶柱纯化技术和独特的溶液体系,可高效地从石埋包埋组织
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