11 第十一章 细胞增殖教学.ppt

细胞增殖通过细胞增殖周期（cell cycle）实现。 细胞周期的有序运行则通过相关基因的严格监视与精密调控来保证。细胞无限制增长对动物或人类个体而言意味着癌症，而个体无限制的繁殖对地球来说意味着生态灾难。 主要的生化事件有：合成rRNA、蛋白质、脂类和糖类等，为DNA合成作准备。 检验点（checkpoint）：在细胞周期中可使细胞周期运转暂停的位点，在这一点上细胞内各条件适宜才允许细胞进入周期的下一阶段。 细胞分裂的方式有三种： 真核细胞分裂主要包括两种方式： 有丝分裂　Mitosis，体细胞分裂方式； 减数分裂　Meiosis，性细胞分裂方式。 原核细胞以无丝分裂 Amitosis 的方式完成细胞分裂。 第三节 特殊细胞周期 细胞分裂所需物质已有准备，细胞分裂快。 子细胞在G1、G2期并不生长，越分裂体积越小； 细胞周期调控因子和调节机制与具有标准细胞周期的体细胞周期基本一致。 植物细胞不含中心体，但在细胞分裂时可以正常组装纺锤体。植物细胞以形成细胞板的形式进行胞质分裂。 第三节 细胞周期长短的测定及细胞周期同步化 这是最经典的测定细胞周期各时相时间的方法。利用3H-TdR（胸腺嘧啶核苷）掺入DNA和放射自显影技术完成检测。 适用于细胞类群相对简单，细胞周期时间相对较短，周期运转均匀的细胞群体。 细胞周期同步化 自然同步化 多核体；某些水生动物的受精卵；增殖抑制解除后发生的同步分裂。 人工同步化 选择同步化； 诱导同步化。 1）有丝分裂选择法 利用M期细胞与培养皿的附着性低，将分裂中的细胞振荡，使其脱离器壁收集。 其优点是，操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害，缺点是获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%） 。 2）细胞沉降分离法： M期细胞体积大，可用离心的方法分离。同时期的细胞体积不同，而细胞在给定离心场中沉降的速度与其半径的平方成正比，因此可用离心的方法分离。其优点是可用于任何悬浮培养的细胞，缺点是同步化程度较低。 处于对数生长期细胞的培养基中加入过量TdR（HeLa 2mol/L；CHO 7.5mol/L），S期细胞被抑制。移去TdR，释放时间大于S期的时长时，再次加入过量TdR，细胞停在G1/S交界处。 优点：同步化程度高 缺点：产生非均衡生长，个别细胞体积增大。 前期 染色质(chromatin)凝缩成早期染色体(由两条染色单体组成)； 微管在中心体周围开始大量组装，形成星体，并向移向两极，分裂极确立，纺锤体(spindle)开始装配； 前期晚期，动粒开始在着丝粒处组装 前中期 染色质进一步浓缩； 核仁(nucleonus)消失，核被膜裂解； Golgi, ER 等细胞器裂解形成小泡； 动粒逐渐成熟； 纺锤体继续组装，微管侵入核中，部分星体微管形成动粒微管、极微管。纺锤体形成，纺锤丝捕获染色体，并拉动染色体向纺锤体赤道面移动。 中期 染色体排列到赤道面上（染色体整列） 纺锤体呈典型的纺锤样，染色体两侧动粒微管等长，作用力均衡，动粒面向纺锤体的两极。 分裂中期/后期存在检验点，控制有丝分裂的细胞从中期向后期的转换。 纺锤体检验点(spindle checkpoint )：所有染色体的动粒都被动粒微管捕获时，染色单体才能分离，细胞由中期向后期运转；否则，细胞将暂停在中期不分裂。 后期 两条染色单体分离，并向两极移动。 机理假说： 后期A 后期B 末期 两条染色单体达到纺锤体两极； 动粒微管消失，极微管加长； 核膜组装 高尔基体和内质网等细胞器重建 核膜组装 核膜小泡与染色体表面结合 ↓ 小泡融合，成片 ↓ 再融合，组装成核膜，同时核孔复合体在核膜上组装 ↓ 染色体去凝集，核仁组装 分裂沟位置的确定：后期，两极纺锤体发出的星体微管末端重合，刺激细胞皮层，赤道板周围表面下陷形成分裂沟，分裂沟的定位与纺锤体的位置相关。 前减数分裂间期 间期也可分为G1期、S期和G2期。 G2期是有丝分裂向减数分裂转化的关键时期。S期持续时间较长。 2. 减数分裂I （1）前期I 时间较长，主要发生染色体配对、基因重组，合成一定量的DNA。分为细线期、偶线期、粗线期、双线期、终变期。 染色质凝集，但两染色单体臂并不分离，呈单线状 细纤维样染色体上出现一系列大小不同的颗粒样结构，称为染色粒 染