免疫胶体在医学检验的进展(共2953字).docVIP

免疫胶体在医学检验的进展(共2953字) 一、定性检测法 免疫胶体金定性检测法主要有斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层析法(GICA)。二种方法都具有检测快速、简单、特异性强、灵敏度高、抗基质干扰强等优点,因此是一种适合基层现场筛查的快速检测方法。 1.斑点免疫金渗滤法 免疫金渗滤技术在上世纪80年代中期从固相酶免疫检定技术上发展出来的。斑点免疫金渗滤法作为一种初筛试验手段，体现了较高的早期诊断价值，有着很好的实用前景。李春晖等人[2]认为在粪便隐血检测中，胶体金渗滤法的灵敏度、抗干扰能力均优于邻甲苯胺法。李如林等[3]利用ELISA、流式微球载体技术(FMA)和胶体金渗滤三种不同方法进行血清梅毒抗体检测，结果显示ELISA、FMA和DIGFA的三种方法灵敏度分别为96.00%、100%和94.00%，三种方法的特异性均为100%，提示三种方法的检测结果具有极强的一致性。 2.胶体金免疫层析法 上世纪90年代初，在免疫金渗滤技术的基础上又建立了一种更为简易快速的免疫层析检测技术。Marot-Leblond等[4]采用GICA法进行阴道念珠菌检测,结果敏感性为100%,特异性为82%,优于传统革兰染色镜检和微生物培养。方春元等[5]用胶体金早早孕定性检测试验和化学发光免疫法进行比较：2.0IU以下与阴性的符合率为100%、2.0～1000.0IU与弱阳性的符合率为97.2%、1000.0IU以上与强阳性的符合率为97.5%，二者结果有着较好的一致性。王玉金等[6]建立了一种霍乱弧菌O139胶体金免疫层析快速检测法，检测霍乱弧菌O139群的最低检出浓度为1×105CFU/ml；与细菌培养法对比检测184份临床标本，特异性和灵敏度均达100％。Brunt等采用GICA技术检测大肠杆菌O157,检测限为500个细菌[7]。梁秋光等[8]用GICA检测含鼠疫阳性参考血清的鼠型动物溶血血清45份，结果全部阳性，而间接血凝微量法的对照结果则无法判断，表明GICA法在应对溶血血清方面有着很大的优越性。孟芳等[9]对心脏疾病患者进行心肌三联测试，其灵敏度肌红蛋白为100%、肌酸肌酶同工酶为96.3%和肌钙蛋白为85.2%；结果表明胶体金法心肌三联检测卡，对诊断急性心肌梗死具有较好的临床诊断价值。 二、半定量、定量检 测胶体金本身具有明显的红色或粉红色，可用肉眼与光学传感器判断检测线(T)的颜色深浅，进行半定量、定量分析。 1.半定量检测法 早期就有人提出硝酸纤维素膜上的显色面积与抗体浓度呈正相关[10]，从而建立了半定量测定方法；曹丹如等[11]建立一种伴有定量质控点的斑点免疫金渗滤法，可半定量检测人尿中的微量白蛋白。该立法与散射免疫浊度法的结果符合性良好，已经达到了对尿微量白蛋白筛查试验的临床要求。 2.定量检测法 随着胶体金免疫定量检测仪的出现，开创了一种新型的快速定量分析方法。定量分析方法的原理是基于硝酸纤维素膜上检测线(T)的颜色深浅与待测物浓度呈现一定的比例关系[12]；利用光学传感器对试剂条进行扫描，与事先制定的标准曲线对比，从而得出定量分析的结果。由于胶体金试纸条检测线显色是一个动态过程，试纸条的生产工艺、检测时的工作环境以及待测样本的差异性等因素都会影响到这一动态显色的结果[13]。因此有人提出了一种检测线(T)/质控线(C)比值定量法。T/C比值法是依据硝酸纤维素膜上的T、C线显色反应的影响因素基本一致，通过T、C线吸光值的比值，在一定程度上可以消除时间、温度和待测样本等因素对试纸条显色过程的影响[14]，是一种较为合理的定量检测方法。谢士嘉等[15]建立的胶体金免疫层析定量方法，能准确地检测样品中的金黄色葡萄球菌肠毒素B，其检出限为8ng/ml，线性范围为8~1000ng/ml。聂聪等[16]所建立的基于T/C比值的胶体金免疫层析方法,对相思子毒素检测的灵敏度已达到为30ng/ml，线性范围30~600ng/ml，敏感性与ELISA法相近，已达到临床检测范围。 三、胶体金技术的其他应用 1.在免疫电镜上的应用 随着胶体金技术的不断发展，人们将其与电镜技术相结合，逐步形成了胶体金免疫电镜技术。它具有灵敏度高、特异性强、定位精确等优点。吴淑燕等[17]建立胶体金标记血小板膜糖蛋白的免疫电镜技术，结果表明利用胶体金技术可以显著的提高样品的检出率，为开展血小板功能研究奠定基础。 2.在纳米磁与核酸适配体上的应用 纳米磁分离-胶体金与核酸适配体-胶体金为当前二种新型的胶体金技术。纳米磁性微粒和核酸适配体作为特异性识别元件，能够将靶分子从成分复杂的生物体系中分离出来，起到样品的浓缩作用，从而提高检测的灵