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实验九玻璃器皿的清洗包扎培养基的制备和灭菌
实验九 玻璃器皿的清洗包扎,培养基的配制及灭菌 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、目的要求 1、明确培养基的配制原理。 2、通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤。 3、了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围 4、了解干热灭菌的原理和应用范围。 5、了解紫外线灭菌的原理和方法。 6、玻璃器皿的清洗包扎要熟练操作。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下: 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂15~20g 水 1000ml pH 7.4~7.6 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 紫外线灭菌是用紫外线灯进行的,波长为200—300nm的紫外线都有杀菌能力,其中以260nm的杀菌力最强。 为了加强紫外线灭菌效果,在打开紫外线灯以前,可在无菌室内(或接种箱内)喷洒3—5%的石炭酸溶液,一方面使空气中附着有微生物的尘埃降落,另一方面也可以杀死一部分细菌。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 超净工作台内紫外灯(线)灭菌 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 三、器材 牛肉膏,蛋白胨, NaCl,琼脂; 1mol/L NaOH, 1mol/L HCl; 试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸( pH 5.5~9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.
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