SELEX技术在自身免疫病中的研究进展.pdfVIP

·10· 垦区鱼痤堂苤盍!Q!兰生!旦筮!!鲞筮!塑!堕』!坐坐!!!!：』塑：!Q!兰：!!!：i!：翼!：! SELEx技术在自身免疫病中的研究进展 王矗 宋武琦王亚贤 张凤民 【摘要】 sELEx技术利用大容量的随机寡核苷酸文库与靶分子的相互作用，从中筛选出高亲和力 和高特异性的寡核苷酸适配体。适配子和靶分子结合后可阻断靶分子的生物学活性，与相应抗体分子 相比适配子具有许多优越性，如分子量小、易于修饰、无免疫原性等。该技术在多种疾病的诊断、治疗方 面都有广泛的应用前景。 【关键词】sELEx技术；自身免疫病；适配体 Research adV锄ce of SELEX techllique in autoimmu玳dise嬲es WANG Yao+，SONG Wuqi，WA刊G Ya)【ian，ZHANG Fengmin． +D印Ⅱn胱眦0，肘icr06i0209y。以hmu加fogy，m洳n盯。增跏讹瑙渺矿乃也扛 ￡ioMf现i嬲e讹d幻i船，mr6流150040，吼iM Con．esponding author：ZHANG Fengmin，E—mail：2433783094@qq．com 【Abstract】 sELEx，a technique which utilizes the interaction of large capacity mndom 01igonucleotide libmry with target molecules to scI℃en and select aptamers with high舶nity and high specificity．These aptam— ers are superior to antibodies in many aspects．They may substitute antibodies and inhibit the bioactivities of their targets．There is a bmad potential of application for SELEX in the treatment of various diseases． 【Key worIls】 sELEx，Autoimmune Disease，Aptamer 自身免疫性疾病是由机体免疫系统针对自身组 织或细胞产生免疫应答，最终导致组织损伤或器官 功能障碍的炎症性疾病。由于临床症状复杂多变， 发病机制也尚未完全明了，因而自身免疫性疾病的 诊断和治疗都面临着巨大的挑战。1990年，一种制 备特异性寡核苷酸分子的技术问世，被称为SELEx (systema矗c evolution of ligands by exponential endch— ment)技术，其可制备具有一定三维结构、能与靶分 子通过立体构象之间的适应性互补(并非碱基配 对)而高特异性、高亲和力结合的寡核苷酸分子-适 配体(印tamer)H引。目前SELEx技术已广泛应用 于自身免疫病的诊断和治疗。 D0l：10．3’760／cma．j．issn．16‘734394．2014．01．【)03 基金项目：国家863计划(2006AA022481)；黑龙江省教育厅科 学技术研究项目 作者单位：150040哈尔滨，黑龙江中医药大学微生物与免疫学 教研室(王壶，王亚贤)；150086哈尔滨医科大学微生物学教研室 (宋武琪，张凤民) 通信作者：张凤民，Email：2433783094@qq．com ·综述· 1 SELEX技术原理及特点 sELEx技术的基本原理：首先合成大量的(约 1014．1017条)随机DNA或RNA寡核苷酸链，这么大 的库容量中必有能与靶分子特异性结合者；接下来 要进行多次循环的筛选富集，随着筛选的进行，选出 的与靶分子结合的寡核苷酸链的特异性和亲和力逐 渐提高，最终所得到的就是能与靶分子特异性结合 的、亲和力最高的一种或几种寡核苷酸链，即为靶分 子的适配体(Aptamer)∞圳。适配体的相对分子质 量一般约6 000～40 000，具有高特异性、靶分子广、 易于体外合成和修饰等优点”J。而RNA适配体的 二级结构(发夹、茎环、G一四聚体等)可使核酸分子 形成多种三维结构，它们主要通过“假碱基对”的堆 积作用、氢键作用、静电作用和形状匹配等产生高特 异性的结合力，从而成为适配体与靶物质特定区域 结合的基础。 sEIJEx技术一般经过6～15轮的循环筛选就 可以获得特异性的适配体，而每轮主要包括3个步 骤：①寡核苷酸库和靶分子孵育；②分离出已结合的 寡核苷酸复合物；③PCR扩增结合序列后再进入下 万方数据 垦匪鱼壅堂盘查垫!垒生!旦墓翌鲞笠!翅!堕』!婴!丝：』塑：堡!垒：y尘：