【新坐标考案（广东专用）高考生物二轮复习 专题讲练突破 专题8 第1讲 现代生物科技专题课件.pptVIP

1.基因工程的原理 (1)基本工具 ①限制性核酸内切酶：识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成平末端或黏性末端。 ②DNA连接酶：连接两个DNA片段的磷酸二酯键，不能连接RNA。包括E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。 ③载体：将目的基因导入受体细胞，能在宿主细胞中稳定存在并复制，具有遗传标记基因，具有多个限制性核酸内切酶的酶切位点。常使用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。 (2)基本操作步骤 ①目的基因的获取 a．从基因文库中获取。 b．利用PCR技术扩增。 c．用化学方法直接人工合成。 ②基因表达载体的构建 a．基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 ③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的检测与鉴定 a．目的基因插入检测：DNA分子杂交技术。 b．目的基因转录检测：(核酸)分子杂交技术。 c．目的基因翻译检测：抗原—抗体杂交技术。 d．个体生物学水平检测：根据目的基因表达出的性状判断。 1．注意切割的序列是否会连接成环：切割图1中的目的基因时，最好不要只用BamHⅠ，因为只用BamHⅠ切割时，目的基因的两端具有相同的黏性末端，易自行连接成环，因此最好同时用BamHⅠ和HindⅢ切割。 2．限制酶的切割序列具有包含关系：图2中BamHⅠ和MboⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别是G↓GATCC、↓GATC，这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。 3．切割时注意是否破坏所有抗性基因，导致缺乏标记基因。 1．(2013·原创题)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。 下列有关叙述错误的是(　　) A．获得含抗病基因的重组质粒不可用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒 B．由①→②、②→③阶段均涉及细胞的分裂与分化 C．④阶段可用不添加植物激素的培养基 D．上述培育过程涉及的生物技术有基因工程、植物组织培养等 【解析】　由①→②为脱分化过程，细胞只分裂形成愈伤组织；而由②→③为再分化过程，细胞既分裂又分化。 【答案】　B 1.动物细胞培养与植物组织培养的比较 据图回答下列问题： (1)过程①所需的酶是____________________ 。 (2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是______________________。原生质体经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 ________植株的根尖，通过________、________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 【解析】　熟记植物体细胞杂交过程，准确解读信息是解题关键。 (1)获取植物细胞的原生质体可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞。(2)根据题干信息可知，供体使用的是叶肉细胞的原生质体，所以可将融合的细胞是否含叶绿体作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体因没有了细胞壁，在低渗溶液中容易吸水涨破，加入甘露醇可保持一定的渗透压，以保持原生质体的完整性。原生质体需再生出细胞壁形成杂种细胞，然后经分裂、脱分化形成愈伤组织。 (4)若要分析再生植株的染色体变异类型，需对再生植株细胞和双亲细胞的染色体形态与数目进行比较。植物细胞有丝分裂装片的制作包括解离、漂洗、染色和制片四个步骤。(5)由图可知，植株1、2、4的条带中除了具有花椰菜的DNA片段外，还有来自黑芥的DNA片段，所以是杂种植株。(6)对杂种植株进行病原体(黑腐病菌)接种实验，若不患黑腐病，即为高抗性杂种植株。 【答案】　(1)纤维素酶和果胶酶　 (2)叶绿体　 (3)保持原生质体完整性　细胞壁　(4)双亲(或花椰菜和黑芥) 　解离　漂洗　(5)1、2、4　(6)黑腐病菌 1．(2012·广东高考T2－B)培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。(×) 【提示】　主要技术应为组织培养。 2．(2013·大纲全国卷T2－B)动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶。(×) 【提示】　植物组织培养不需要用胰蛋白酶。 3．(2013·重庆高考T2－A改编)与鼠骨髓瘤细胞融合的淋巴细胞是效应T细胞。(×) 【提示】　用到的淋巴细胞应为已免疫的B细胞。 4．(2013·重庆高考T5－C)愈伤组织培养后的出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控。(√) 5．(2013·江苏高考T22－B)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基