高中生物 11 微生物的分离和纯培养课件 中图版选修1.ppt

根据某些微生物的营养需求特点及生理生活条件，配制特定的培养基，进行该微生物的分离和纯培养。 (1)无菌技术的主要操作要求 ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒； ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌； ———探究特定微生物的分离和纯培养——— 技法必备 1．实验原理 2．实验方法 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 (2)接种、培养与纯化 ①采用平板划线分离法进行接种； ②放入恒温培养箱中进行培养； ③挑取单个该种微生物的菌落进行纯化培养。 某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。 (1)采样与培养 将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过________法灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28 ℃振荡培养。 (2)接种与选择 为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30 ℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。 能力展示 (3)筛选与纯化 将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板上，可对菌株进行进一步的纯化。 解析　本题主要考查微生物培养有关知识。 (1)灭菌方法一般用高压蒸汽灭菌，由于接下来要用涂布法接种，所以要用液体培养基(或者从第2小题也可以得出)。 (2)减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以应该用含有淀粉为唯一碳源的培养基；倒置可以防止培养基受污染；为排除其它因素影响，需要设置未接种的空白的培养基作为对照组。 (3)淀粉被水解，培养基会出现透明圈的现象。用划线法来培养，可进一步纯化菌种。 答案　(1)高压蒸汽灭菌　液体　(2)系列稀释(或梯度稀释)　淀粉　倒置　未接种的空白培养基(或接种等量无菌水的培养基)　(3)出现透明圈　分泌淀粉酶使淀粉发生水解　平板划线  下列接种操作过程中，不正确的是 (　　)。 A．要将接种环灼烧灭菌 B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌 C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位 D．接种后还要将试管口灭菌加塞 解析　接种环伸入试管后应先接触未长菌的部位，待接种环冷却后再接触长菌部位。 答案　C 1. (广东调研)分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述错误的是 (　　)。 A．均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面 B．获得的每个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群 C．都应在火焰附近进行操作，以防止杂菌污染 D．稀释分散菌种的原理不同，均能达到分离纯化大肠杆菌 的目的 解析　本题考查平板划线法和稀释涂布平板法。用稀释涂布平板法时，如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能是由一个细菌细胞繁殖形成的。 答案　B 2． 下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。请回答下面的问题。 试剂 用量 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g NaCl 5 g 琼脂 20 g 蒸馏水 1 000 mL 3． (1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________和________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行________处理。 (2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是________和________两种。在接种过程中，接种环或涂布器的灭菌方法是____________________________________________。 (3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片，可能的原因是什么？______________________________。 解析　本题考查微生物培养的有关知识。牛肉膏和蛋白胨都是从天然物质中提取出来的，都含有丰富的有机物，可以为微生物提供碳源和氮源。平板划线法和稀释涂布平板法都能使菌体分散开，但是如果操作不当，会使分离效果不理想。 答案　(1)牛肉膏　蛋白胨　灭菌 (2)平板划线法　稀释涂布平板法　灼烧灭菌 (3)菌液浓度过高；培养过程中被杂菌污染；利用接种环划线时，划下一个区域前没有对接种环进行灭菌处理(答出一项即可) 课堂小结 课堂互动探究