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微生物实验注意事项

微生物实验注意事项 1. 实验过程中要及时详细标清除产物和日期,实验做完以后要对以前的过度产品做个清理,以免东西积累过多。 2. 实验后的DNA和RNA要及时放回冰箱,以免时间长降解,特别是用水溶解的时候。 3. 要及时甘油保存你鉴定出的细菌,每个细菌保存两份,存放在-80度冰箱里。 4. 实验用的酶类虽然在室温下放一段时间也没什么问题,但还是要及时放回冰箱,以免活性降低。 5. 要及时清理实验台面,保持干净,整洁,有序。 6. 无菌操作台用后及时清理干净,操作真菌和细菌等最好不要交叉使用。 7. 培养基使用的时候要注意无菌操作,移液器不要插入培养基中,之准许无菌枪头进入瓶子腔体,如培养基较少,可以倾斜瓶子,移液器取液体最好不要用到最大量程,以免吸液过猛导致与移液器接触。 8. 灭好的培养基标签一定要写好,包括名称,日期,是否加抗生素,是否加抗生素非常重要,特别是在共用培养基的实验室。 9. 实验用过的试剂盖子一定要盖好,以免挥发。特别是有毒的物品,如氯仿,苯酚等,用完后的瓶子及时拿出实验室。 10. 带手套接触有毒物品后,要及时处理掉手套。不管是否接触过有毒物品,,不要戴着手套乱接触其他东西,如开窗等。 11. 做实验过程中不要接电话,说话,考虑其他事情。特别是PCR和配溶液的时候。做PCR和配溶液的时候要把所用的试剂找全,一字排开,加完一种东西就把这种东西放到一边,可防止自己少加错东西。 12. 同时作几个实验的时候一定要有定时器,防止自己忘记,特别是在煮东西,加热溶化溶液等危险操作的时候,切忌。 13. 饭前,有活动前不要做实验,这时候匆匆忙忙非常容易出错,特别是作有危险的实验,更要注意。 14. 作好试验记录,不管有没有结果,一定要坚持。还有点用图片,测序结果等,如果不清楚记录东西多了,就乱了,混了。这个一定要认真做好。 15. 要随时写下自己的想法,因为有些想法稍纵即逝。 微生物实验注意事项 一、无菌操作要求 1. 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。 2. 进行接种食品样品时,必须穿专用的工作服、帽及拖鞋,应放在无菌室缓冲间,工作前经紫外线消毒后使用。 3. 接种食品样品时, 应在进无菌室前用肥皂洗手, 然后用 75%酒精棉球将手擦干净。 4. 进行接种所用的吸管,平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高压灭菌或用 95%酒精点燃烧灼三次后使用。 5. 从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位,使用吸管接种于试管或平皿时,吸管尖不得触及试管或平皿边。 6. 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌或样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。 7. 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必要时还要烧到环和针与杆的连接处,接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸 5min,再经火焰烧灼。 8. 吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得直接用口吸。 二、无菌间使用要求 1. 无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃,并要密封,不得随意打开,并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门, 另设有 0.5-0.7m2 的小窗, 以备进入无菌间后传递物品。 2. 无菌间内应保持清洁,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作台面,不得存放与实验无关的物品。 3. 无菌间使用前后应将门关紧, 打开紫外灯, 如采用室内悬吊紫外灯消毒时, 30W 需紫外灯,距离在 1.0m 处,照射时间不少于 30min,使用紫外灯,应注意不得直接在紫外线下操作, 以免引起损伤, 灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭, 除去上面灰尘和油垢, 以减少紫外线穿透的影响。 4. 处理和接种食品标本时,进入无菌间操作,不得随意出入,如需要传递物品,可通过小窗传递。 5. 在无菌间内如需要安装空调时,则应有过滤装置。 三、消毒灭菌要求 微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等,必须经灭 菌后方能使用。 (一)干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法 1.灭菌前准备 (1)所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干,玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密,如 用金属筒应将上面通气孔打开。 (2)装培养基的三角瓶塞,用纸包好,试管盖好盖,注射器须将管芯抽出,用纱布包 好。 2.装放 (1)干热灭菌器:装放物品不可过挤,且不能接触箱的四壁。 (2)大型高压蒸气锅:放置灭菌物品分别包扎好,直接放入消毒筒内,物品之间不能 过挤。 3.设备检查 (1)检查门的开关是否灵活,橡皮圈有无损坏,是否平整。 (2)检查压力表蒸气排尽时是否停留在零位,关好门和盖,通蒸气或加热后,观察是否漏气,压力表与温度计所标示的状况是否吻合,管道有无堵塞。 (3)对有自动电子程序控制装置的灭菌器,使用前应检查规定的程序,

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