空气沉降菌检验规范2011.docVIP

Prepared by/编制者： Reviewed by/审阅者： Authorized by/批准者： ALTECH 　 ALTECH 　 ALTECH 　 Date/日期 　 Date/日期 　 Date/日期 　 SCMC 　 SCMC 　 SCMC 　 Date/日期 　 Date/日期 　 Date/日期 　 修订记录 修订次数 修订日期 修订内容 目的检测灌注间、微生物室空气的微生物状况。 范围适用于灌注间充填系统内外、糖房及微生物室空气的微生物状况。 职责微生物品控员负责空气微生物的检测 设备及试剂?90mm培养皿 75%酒精 Plate Count Agar 程序 平皿准备 按测试样品的数量准备好已经高温杀菌且冷却了的平皿，每个测试项目加上一个平皿作对照试验，称取并配制灭菌好培养基。(具体的测试频率和数量见表1) 将灭菌后的培养皿高温烘干，冷却后待用。 在超净工作台内将每个培养皿中加入15ml~18ml的培养基，待培养基凝固后方可取样。 取样 首先将双手用75%酒精灭菌，再将培养皿表面用75%酒精灭菌。 注：喷洒酒精时，培养皿需密闭，不得将酒精进入培养皿内。 将培养皿置于待检测地点，打开培养皿，放置相应的一段时间。注：同一点放置两个PCA平板，一个用作培养细菌，另一个作霉菌/酵母培养。 在培养皿放置地点要避免人员走动引起的污染。 将培养皿分别放在35oC和28oC下培养。培养48小时后记录每个培养皿的菌落数。参见附表1：空气的微生物测试表 参考文献 本文件支持纲要文件: 微生物监控纲要。 相关纲要文件： 倒平板的微生物测试。 附件/记录 记录： 微生物每日报告/空气落菌检验报告 7.2附件：空气微生物测试频率及测试点 检测地点 检测频率 平皿数量 放置时间 检测项目 标准 微生物实验室 操作台台面 每次微生物测试时 每个测试项目各一个 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作参考，以监测环境的微生物状况 无菌室桌面/地面 每周一次 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作参考，以监测环境的微生物状况 缓冲间桌面/地面 每周一次 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作参考，以监测环境的微生物状况 灌注间 洗瓶机区域 生产后 每个测试项目各一个 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 0cfu 充填机区域 生产后 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 0cfu 压盖区域 生产后 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 0cfu 充填系统外环境（至少测3个点） 生产后 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 0cfu 倒盖平台 每周一次 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作参考，以监测环境的微生物状况 吹瓶间 瓶胚储藏间 （至少2个点） 每周一次 每个测试项目各一个 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作参考，以监测环境的微生物状况 倒胚平台 每周一次 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作8参考，以监测环境的微生物状况 空气输送线 进灌注间前，出吹瓶间后的线段 （至少2个点） 每周一次 各1 30分钟 细菌总数 酵母和霉菌 仅作参考，以监测环境的微生物状况 玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌 一、目的要求：1、熟悉微生物实验所需的各种常用器皿名称和规格。2、掌握对各种器皿清洗方法。3、掌握玻璃器皿的干热灭菌操作过程 。二、材料：1、常用各种玻璃器皿。2、清洗工具和去污粉、肥皂、洗涤液。3、电热干燥箱。三、概述：为了保证实验顺利进行，要求把实验用器皿清洗干净。保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎。试管和三角瓶要做棉塞。这些工作看来很普通，如操作不当或不按规定要求去做，会导致实验的失败。因此应看作是微生物实验的基本操作。四、方法：（一）器皿洗涤的注意事项和方法：1、任何洗涤方法，都不应对玻璃器皿有所损伤，所以不能用有腐蚀作用的化学药剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿。2、一般新的玻璃器皿用2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充洗干净。3、用过的器皿应立即洗涤，有时放置太久会增加洗涤困难。4、难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起。有油的器皿不要与无油的器皿放在一起，否则使本来无油的器皿也沾上了油垢，浪费药剂和时间。5、强酸、强碱、琼脂等腐蚀、阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须倒在废缸内。6、含有琼脂培养