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GB/7门7999.7一1999 前 言 血清平板凝集试验是监测鸡自痢一鸡伤寒沙门氏菌感染的常规方法，但是某些其他细菌感染后，也可出现 一定的阳性反应，这就有赖于细菌分离，作为最终结果判定，为此本标准规定了SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验方法。 SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准，包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法 本标准为《SPF鸡 鸡自痢沙门氏菌检验》。 SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分: GB/T17999.1-1999 SPF鸡 红细胞凝集抑制试验; GB/T17999. 2--1999 SPF 74 血清中和试验; GB/T17999.3-1999 SPF鸡 血清平板凝集试验; GB/T17999.4- 1999 SPF 9鸟 琼脂扩散试验; GB/T17999.5--1999 SPF鸡 酶联免疫吸附试验; GB/T17999.6一1999 SPF鸡 胚敏感试验; GB/T17999.8--1999 SPF鸡 试管凝集试验; GB/T17999. 9一1999 SPF鸡 间接免疫荧光试验 本标准山中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出 本标准由农业部畜牧兽医司归[1 本标准起草单位:中国兽药监察所、农业部实验动物研究中心 本标准主要起草人:张学琴、陈德威、赵立红 中华人民共和国国家标准 SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验 GB/T 17999. 7一1999 SPF ehiekem -Examination of Salmonella Pullorum 1 范围 本标准规定了鸡白痢沙门氏菌检验所用试剂、材料，检验程序及结果判定等。本标准适用于SPF鸡感染鸡白痢一鸡伤寒沙门氏菌后的细菌分离和鉴定 2 原理 取待检样品(肠内容物、有关脏器匀浆)接种于增菌培养基中进行增菌，然后将培养物转移到选择、鉴别培养基卜培养，挑选可疑菌落接种于营养琼脂培养基上，取培养物进行生化试验与血清学试验，以确定鸡白痢沙门氏菌与鸡沙门氏菌。 3 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T 14926.1-1994 实验动物 沙门氏菌检验方法 GB 4789. 4-1994 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验 4 材料和试剂 4.1 营养肉汤培养基按GB 4789. 4执行。4.2 改良亚硒酸氢钠增菌液(SF)按GB/T 14926.1-1994中3. 1的规定执行4.3 DHL琼脂按GB 4789.4-1994中3.19的规定执行。4.4 ss琼脂按GB 4789.4-1994中3.21的规定执行。4.5亚硫酸秘琼脂(BS)按GB 4789.4-1994中3.18的规定执行。4.6 三糖铁培养基(TSl)按GB 4789. 4- 1994中3.24, 3.25的规定执行。4.7 营养琼脂按GB 4789. 4--1994中3. 7的规定执行。4.8 半固体琼脂按GB 4789.4-1994中3.28的规定执行。4.9 糖发酵管按GB 4789. 4-1994中2. 2的规定执行4.10 蛋白陈水按GB 4789.4-1994中2.13的规定执行。4-11 硝酸盐培养基按GB 4789.4-1994中2.17的规定执行4.12 氧化酶试剂按GB 4789.4-1994中2.18的规定执行。4.13 WA酸脱梭酶试验培养基按GB 4789. 4 -1994中2.21的规定执行4.14 尿素培养基按GB/T 14926.1-1994中3.7.1的规定执行4. 15 革兰氏染色法按GB 4789.4-1994中1.2的规定执行。4.16 沙门氏菌诊断血清国家质量技术监督局1999一们一10批准 2000一04一01实施 GB/T 17999. 7-1999 5 检验程序 检验程序见图1 I 8h- 24h 图1 沙门氏菌检验程序 6 操作步骤61采样:无菌采取有病变的卵巢、输卵管、翠丸、心包膜与心包液、胆汁、肝、脾以及小肠和盲肠6.2 将HP,脾月困十、心包膜、心包液、输卵管、翠丸混合样品，放入灭菌乳钵或均浆器中研磨成匀浆，加入少肚营养肉汤稀释。取此匀浆10 mL接种到100 mL SF增菌液中，另取匀浆10 mL接种到100 ML营养肉汤培养基中。采取的小肠与盲肠样品，按上述方法制成匀浆，取10 mL接种到100 mL SF增菌液中。分别将背养肉汤培养瓶置36C11℃培养24