显齿蛇葡萄查耳酮合成酶基因cDNA克隆及蛋白质序列分析.PDFVIP

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 1 期 2013 年 1 月 ? 85 ? 显齿蛇葡萄查耳酮合成酶基因 cDNA 克隆及蛋白质序列分析 付 明，魏 麟，余 娟，余小林 怀化学院 生命科学系，民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室，湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实 验室，湖南 怀化 418008 摘 要：目的 对显齿蛇葡萄 Ampelopsis grossedentata 查耳酮合成酶（CHS）基因进行克隆及序列分析。方法 根据已经克 隆的植物基因的保守序列设计一对引物，以显齿蛇葡萄总 RNA 为模板，采用 RT-PCR 的方法扩增 CHS 基因序列并连接到 pMD18-T Simple 载体上，阳性克隆经 PCR 检测后进行测序。结果 得到一段 1 173 bp 的序列，序列分析表明，该片段编码 390 个氨基酸，与其他高等植物 CHS 基因氨基酸序列同源性在 67.9%以上。结论 首次从显齿蛇葡萄中克隆了 CHS 基因， 为有效利用该基因奠定了基础。 关键词：显齿蛇葡萄；查耳酮合成酶；基因克隆；序列分析；保守序列 中图分类号：R282.12 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)01 - 0085 - 05 DOI