1-细胞生物学实验技术解析.pptVIP

检测系统 激光扫描共聚焦显微镜为多通道荧光采集系统，光路上要求至少有3个荧光通道和1个透射光通道，样品发射荧光的探测器为感光灵敏度高的光电倍增管PMT，配有高速12位A/D转换器，可以做光子计数。每个PMT前设置单独的针孔，由计算机软件调节针孔大小，光路中设有能自动切换的滤色片组，满足不同测量的需要。通过在线视频打印机或数字照相机可以实时拷贝图像和制作幻灯。 计算机系统 激光扫描共聚焦显微镜的各个部分由计算机设置和控制，共焦图像文件大，每幅单色图像要256kb以上，而且每次采集图像一般需要将几幅甚至上百幅图像作为一个文件存储，因此对计算机软件功能、运行速度，内存、硬盘要求很高。 * * （1）材料：培养的人宫颈癌HeLa细胞(细胞系)，盖玻片(厚度在0.13~0.17mm)； （2）试剂：PBS，4%多聚甲醛，TPBS，一抗分别为兔抗-肌动蛋白多克隆抗体、鼠抗-微管蛋白单克隆抗体，二抗分别为FITC标记抗兔Ig-G、TRITC标记抗鼠Ig-G。 （3）设备：激光扫描共聚焦显微镜。 * * 三、实验用品 * * 1、接通总稳压器电源开关。 荧光显微镜：先接通透射光源(卤素灯)，调节灯电流使之适应观察样品；再接通汞稳压电源。开启汞灯后，必须使其工作1h再关闭，并需等其冷却15~20min后方可再次启动，尽量减少开关次数以延长汞灯寿命。