第六章基因表达调控汇总.pptVIP

有一个新的问题 半乳糖有两个作用 1）可以作为碳源供细胞生长 2）尿苷二磷酸半乳糖（UDPgal）是大肠杆菌细胞壁合成的前体。 分析： UDPgal在细胞中必须存在；那体系中没有乳糖怎么办？ UDPgal可用UDPglu异构而来；执行异构反应的酶是GalE，后者是半乳糖操纵子的结构基因。 问题： GalE只有在葡萄糖不存在而半乳糖存在的情况下才表达，可是细胞不管你有没有半乳糖，我都需要GalE存在（因为需要UDPgal ）。矛盾？ gal操纵子的特点 它有两个相距仅5 bp启动子，其mRNA可从两个不同的起始点开始转录； P1起始（强启动）:需要半乳糖+CAP+cAMP P2起始（弱启动）：低浓度cAMP-CAP（即存在葡萄糖）。 总结起来： 1）无glu有gal，P1高效起始； 2）有glu无gal，P2低效起始。 问题： 1）有glu有gal，如何起始？ 2）无gal时，阻遏蛋白仍然结合O位点，RNApol如何从P2起始呢？ 两个转录起始位点的生物学意义 半乳糖不仅作为碳源供细胞生长，另一方面尿苷二磷酸半乳糖（UDPgal）是大肠杆菌细胞壁合成的前体； 在半乳糖存在的情况下，由半乳糖操纵子合成UDP-gal；在没有半乳糖的情况下，UDP-gal是通过半乳糖异构酶的作用由UDP-Glu合成的，该酶是GalE基因的产物；因此，细菌必须以低水平不断合成GalE； 若只有P1，当Glu存在时，无法合成GlaE，若只有P2，当Glu不存在而Gla存在时，无法高水平合成Gal酶系统。 6.5 色氨酸操纵子 生物细胞中的氨基酸合成， 也受操纵元的调节。细胞需要某种氨基酸时，其基因即表达，不需要时基因关闭，达到经济的原则； 色氨酸操纵子的结构 trpR, 阻遏蛋白 P，-40~+18 O, -21~+1 L, +1~+162 结构基因 t, A下游36bp, 不依赖p t’, t下游250bp，依赖p 6.5.1 转录水平的调控 　通过阻遏物结合操纵子，转录效率降低至1/70；然而细胞中，在阻遏状态下，trp酶系统的酶活却只有1/700，那么，是不是还存在另外一个阻遏系统呢？ 6.5.2 翻译水平的调控 前导肽的前后序列结构 4个片段进行配对，形成不同的二级结构 Lack of trp Lack of aminoacyl tRNA Ribosome pause at trp codons, occluding sequence 1 Form 2:3 hairpin anti-terminator Transcription into trpE and beyond High trp Trp is inserted at the trp codons Translate to the end of leader message Ribosome occlude sequence 2 Terminate transcription at (3:4 form terminator) 衰减子普遍的生物学意义 6.6 ?噬菌体基因表达的调控 λ噬菌体进入细菌细胞以后，可以按裂解或建立溶原两种生活方式生存和繁殖； 在每个菌体内繁殖100个左右的新噬菌体，并裂解细菌释放出来，再度感染其它活菌，称为裂解； λ噬菌体把自身DNA整合进细菌染色体DNA中，作为细菌基因的一部分，随菌的细胞分裂而增殖，这种生活状态称为溶原； 噬菌体是如何进行选择，是进入裂解还是溶原途径呢？ cro cⅡ O P Q PROR tR1 tR2 tR3 PR’ tL1 PLOL PM PE OR3 OR2 OR1 OL1 OL2 OL3 早期 N Cro 晚早期 CⅢ CⅡ O P Q 晚期 PE PM CⅠ CⅠ cⅢ N cⅠ λ噬菌体基因调控过程 早期 由PL转录翻译出抗终止蛋白N，由PR转录出调节蛋白Cro; 晚早期 在N蛋白的作用下，使得RNApol 越过tL1、tR1、tR2，从而使蛋白CⅢ、CⅡ、复制相关蛋白O、P，抗终止Q等表达； CⅢ与CⅡ共同作用，启动cro与cⅡ基因之间的启动子PE，使得CⅠ的得以表达； 转录出来的RNA含有cro基因的反义mRNA，后者