植物细胞工程的基本技术综述.ppt

1996年7月5日,世界上第一只体细胞克隆 动物--克隆羊多利诞生于英国。 这样的生物技术属于何种生物工程？ 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 什么叫细胞工程？包括哪两大领域？ 细胞工程 主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 2.1植物细胞工程 §2.1.1植物细胞工程的基本技术 植物组织培养 利用菊花花瓣微型繁殖培养的菊花 再分化 (愈伤组织) 植物组织培养 6 脱分化 愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化，由无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 脱分化的实质和结果分别是什么？ 实质是恢复细胞的全能性过程。 结果是形成愈伤组织。 植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程。 探究： 1、为什么植物的一个花瓣就可以培育出完整的植株呢？ 植物细胞具有全能性。 2、什么是细胞的全能性？ 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞发育成完整个体的潜能的特性。 2、原因： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 3、差异： （1）受精卵的全能性最高 （3）受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞低 4、大小： 一、细胞的全能性 植物细胞＞动物细胞 （2）生殖细胞的全能性较高 分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞 探究： 1、克隆羊“多利”的诞生说明了什么？ 2、生物体内的细胞为什么没有表现出全能性，而是分化成不同的组织器官？ 表现全能性的条件有哪些？ 离体、提供营养物质、激素及其它适宜条件。 细胞核中含有保持物种遗传性所需的全套基因，并没有因为细胞分化而丢失基因，高度分化的细胞的细胞核仍具有全能性。 在特定的时间和空间条件下，基因选择性的表达的结果。 1、有关全能性的表述中，不正确的是（ ） Ａ．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 Ｂ．生物体内细胞由于分化全能性不能表达 Ｃ．卵细胞和受精卵一样，细胞未分化，全能性一样高 Ｄ．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性 C 练习： 2.在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为 （ ） A、细胞的基因丧失了全能性 B、基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果 C、不同的细胞内基因不完全相同 D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化 B 要把一块组织通过培养得到一株完整植株, 应该如何操作呢? 请同学们阅读P34实验完成P35讨论题。 切取 接种 培养室 愈伤组织的形成 试管苗 移栽 切取 形成层 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 试管苗的形成 培养室 移栽 脱分化 再分化 (1)在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？ 植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分，有利于培养物的生长，然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长，所以植物组织培养过程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡。 造成培养基污染的因素有很多，一般包括：外植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操作人员操作不规范等。所以在组织培养实验中用到的植物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌，实验人员操作一定要规范，避免带入杂菌。 (2)在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下，胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花），是否也能培养成小植株，你能用实验的方法进行验证吗？ 胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。 (3)请根据上面的实验过程，概括出植物组织培养技术的流程简图。 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 二、植物组织培养 1、概念 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 外植体 脱分化 植物激素： 细胞分裂素、生长素 再分化 2、过程 植物组织培养条件： 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 遮光