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黄瓜组织培养与组培苗嫁接研究
黄瓜组织培养与组培苗嫁接研究李建欣1,2庞淑敏1李建吾2*(1郑州市蔬菜研究所,郑州 450015;2河南农业大学林学园艺学院,郑州450002)摘要:采用黄瓜自交系2~3 d子叶为外植体,以MS为基本培养基,探讨了AgNO3和BA的浓度组合对芽的诱导和增殖的影响;并以云南黑籽南瓜为砧木,黄瓜子叶组织培养再生芽为接穗,进行嫁接,比较了不同砧木苗龄、培养方式和接穗大小对嫁接成活率的影响。研究结果表明,黄瓜组织培养最佳诱导培养基:MS+BA 1.0 mg·L-1+ AgNO3 1.0 mg·L-1,最佳增殖培养基:MS+BA 2.0 mg·L-1+ AgNO3 1.0 mg·L-1;组培苗的嫁接接穗长为2.5+0.5 cm,砧木苗龄为三叶一心时嫁接成活率最高,可达100%。关键词:黄瓜;组织培养;不定芽;嫁接Studies on Tissue Culture and Regenerating Plantlet Grafting of Cucumber Li Jian-xin1,Ge Gui-min1,Li Jian-wu2*(1Zhengzhou Research Institute of Vegetable,Zhengzhou 450015; 2College of Forestry and Horticulture,Henan Agricultural University, Zhengzhou,450002)Abstract: Two to three-day seedling cotyledons from self-crossed series(cultivars) 69 of cucumber(cucumis sativus L.) was cultured as explants on medium MS supplemented with AgNO3 and BA in different concentrations.And the grafting experiment was with Yunnan black seed cushaw as rootstock and the regenerated shoots of cucumber as cions.The results showed that the optimum regenerating medium was MS+AgNO3 1.0 mg·L-1+BA1.0 mg·L-1, The optimum multiplication medium was MS+BA2.0 mg·L-1+ AgNO31.0 mg·L-1;The survivor rate of seedling graft was 100% when the size of cions were 2.5+0.5cm and the rootstocks were 3 leaves and a half.Key words: Cucumber(Cucumis sativus L.); Tissue culture;Adventitious shoot;Grafting 基金项目:河南省重点科技项目(0123011000)部分内容,本研究完成单位:河南农业大学。作者简介:李建欣(1975.10-),女,助理研究员,硕士,主要从事蔬菜育种与生物技术研究。通讯作者:李建吾(1964.02—),男,副教授,博士,硕士生导师,主要从事蔬菜育种与生物技术研究。E-Mail:lijw555@黄瓜组织培养是根癌农杆菌介导黄瓜遗传转化的基础环节,只有建立高效高频的黄瓜组织培养再生体系,才能保证农杆菌介导的基因转化顺利进行。至今人们已对黄瓜子叶[1~3]、真叶[4]、子叶节[5,6]、原生质体[7~9]和未受精子房[10]等进行了再生植株的研究,但多数存在周期长,重复率差,出芽率和再生率低等一系列问题。本试验在总结前人经验的基础上,采用2~3d苗龄的子叶为外植体,就不同BA和AgNO3浓度组合,对建立高效的黄瓜子叶离体再生体系进行了研究,为进一步开展黄瓜转基因育种奠定基础。由于黄瓜组培苗生根和炼苗移栽需要大约30d时间,周期长,而且长势弱,易早衰,所以本试验研究了黄瓜组培苗的嫁接。黄瓜的嫁接在大田生产中具有重要的意义,采用黑籽南瓜作砧木,不仅能够明显增进黄瓜的抗病性和抗逆性,而且能增加产量。黄瓜组织培养苗的嫁接,在国内外还没有报道,研究黄瓜组培苗的嫁接,将会有效提高组培苗的成活率,缩短组织培养周期,加快农杆菌介导的黄瓜遗传转化的育种进程。1 材料和方法1.1 试验材料黄瓜自交系‘IL69’,由河南农业大学林学园艺学院蔬菜遗传育种实验室提供。嫁接砧木为河南豫艺种业科技发展有限公司提供的嫁接专用
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