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生物化学技术实验部分(2010版) Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 生物化学研究的核心任务： 阐明生命现象的分子机理。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 生物大分子物质制备的基本过程： 确定测定方法 材料的选择与处理 抽提 浓缩 纯化 有效成分纯度和性质的分析 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 电 泳 前处理 浓缩、粗分离 细分离 生物组织 无细胞提取液 破碎、溶 解、差速离心、过滤 沉淀法 亲和层析 离子交换层析 精制后的蛋白质 凝胶过滤 吸附层析 蛋白质的制备： Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、蛋白质的性质： （1）两性解离的性质：pI （2）胶体性质：不能通过半透膜 （3）具有沉淀作用：等电点沉淀法、盐析法和有机溶剂沉淀法等 （4）变性、复性 （5）紫外吸收 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、分离纯化蛋白质的主要方法 （一）根据溶解度差异分离：选择性沉淀法 等电点沉淀法 盐析法 有机溶剂沉淀法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 有机溶剂沉淀法 利用生化物质在不同浓度的有机溶剂中溶解度差异而分离的方法。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 降低水活性，使溶液的介电常数下降，增加蛋白质溶质分子之间 的作用力，因而聚集在一起。 Membrane protein ■ 有机溶剂沉淀法 Water-soluble protein Water-soluble protein 有 机 溶 剂 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 有机溶液沉淀法的优缺点 优点 分辨力比盐析法高，溶剂易于除去和回收。 缺点 易使某些蛋白质或酶变性。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 常用的有机溶剂 乙醇、丙酮 丙酮沉淀能力比较强 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 用有机溶剂沉淀法时应注意的问题 ① 温度的控制 ②有机溶剂的选择 ③pH值的选择 ④离子强度的选择 ⑤分离溶液浓度的控制 ⑥及时处理沉淀物 Evaluation only. Created with Aspose.Slide