《生物化学》荧光定量PCR技术在临床检测中的应用.ppt

PCR与基因诊断技术 基因诊断即通过核酸的分子生物学检测直接检测基因的存在状态或缺陷对疾病作出诊断的方法。 Polymerase chain reaction(PCR)，聚合酶链式反应，是一种DNA的快速扩增技术。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热酶的作用，可在3个小时内把特定的DNA片段扩增1000万倍。 九十年代中期PCR临床应用在国内全面开展，1998年，荧光定量PCR技术开始在中国应用于临床检测。 概念 基本原理 以DNA为例 （1）DNA变性： （2）降温退火： （3）引物延伸： 原理 第一步 – 加热变性 预处理 第二步 – 引物与靶序列退火 第三步 - 引物延伸 第1个 PCR 循环完成后 – 得到两个拷贝的靶序列 30次循环后靶序列扩增的数量 荧光PCR的原理 PCR技术的特点 灵敏度高 特异性强 快速简便 应用范围广 Ct值的意义 一 感染性疾病 　 1. 病原体含量与病情之间的关系 　 2. 病原体含量与用药之间的关系 　 3. 药物及疗法的研究与开发 　 4. 新的病原体分子诊断标准 　 5. 新的愈后指标 　 6. 传染病发病的监控、预测与预防 荧光定量PCR在病原体检测中的应用 一 肝炎病毒定量检测 二 性病病原体检测 三 结核杆菌及呼吸道病原体检测 四