环烯醚萜类化合物的提取分离纯化和含量测定方法研究进展.docxVIP

摘要：环烯醚萜类化合物是植物中存在的一大类化合物，具有多种药理活性，是许多中药的主要有效成分，本文对环烯醚萜类化合物的提取方法（浸渍法、微波法、超声波提取法、超临界流体萃取法），分离纯化方法（大孔吸附树脂法、柱层析法、HSCCC法），含量测定方法（紫外分光光度法、HPLC法、色谱联用技术，二阶导数光谱法、双波长薄层扫描法）进行综述，为环烯醚萜类化合物的进一步研究开发提供参考。前言：环烯醚萜类属于单萜化合物，是许多中药的主要有效成分，为蚁臭二醛的缩醛衍生物，是许多中药的主要有效成分，广泛存在于植物界。该类化合物具有多种生物活性，主要表现为：保肝作用，利胆作用，降血糖血脂作用，抗炎作用等。其大部分为苷类成分，大致分为普通环烯醚萜苷类、裂环环烯醚萜苷类、4-位无取代环烯醚萜苷类等[]。本文将结合近10年研究成果，从环烯醚萜类化合物的提取，分离纯化、含量测定等方面综述其研究进展，为系统地进行环烯醚萜类化合物的质量控制提供参考。1 环烯醚萜类化合物提取方法1.1浸渍法环烯醚萜类的提取一般采用溶剂提取法。由于该类化合物在植物体中以苷的形式存在，极性较大，所以溶剂一般选用极性较大的水、甲醇、乙醇、烯丙酮、正丁醇、乙酸乙酯为提取溶剂[]。许婧等[]用95%甲醇冷浸的方法，从蜘蛛香中提取环烯醚萜类化合物。采用加压溶剂提取法从兔儿尾苗叶中提取梓醇和桃叶珊瑚苷较常压提取，提取率更高[]。京尼平苷的和京尼平苷酸的最佳提取工艺为70℃下提取2次，提取时间为1h，溶剂为12倍体积的50%的甲醇[]。栀子总环烯醚萜苷提取中，比较了水提醇沉法和醇提水沉法的异同，前者有效成分的损失比较大，而醇提和醇提水沉的提取率较大，且醇提水沉法较醇提提取率更高[]。1.2微波法微波提取是把微波作为一种与物质相互作用的能源来使用，与传统方法相比，该方法有提取成分不易分解、耗时短、耗能低、环境污染小等优点。贺娟妮[]确定了从山茱萸中提取三种环烯醚萜苷的最佳微波提取工艺为：以体积分数72%的乙醇作为溶剂，液料比为15mL/g，在微波功率400W下提取10min，连续提取两次。聂颖杰[]通过比较热回流、超声、微波提取及溶媒，证明微波醇提效果最好，最佳提取方案为：料液比1:30，提取时间6分钟，提取三次。1.3超声波提取法超声波提取是利用超声波空化作用加速植物有效成分浸出的提取。该法具有设备简单、操作方便、提取时间短、提取率高、无需加热、保护热不稳定性成分等优点[]。刘海洋等[]通过超声提取正交试验确定影响结果的因素顺序为：乙醇的浓度乙醇的用量提取时间提取次数；得出用10倍量的80%乙醇提取2次，每次1.5h，地黄中梓醇的提取率最高。丁平等[]采用不同的提取方法提取巴戟天中的水晶兰苷，利用HPLC确定提取率，最后确定超声提取法提取率最高，并通过正交试验得出最佳的提取条件为：用200倍量80%甲醇，超声提取2次，每次30min。1.4超临界流体萃取法超临界流体萃取技术有提取速度快、收率高、工艺流程简单、操作方便、绿色环保等优势[]。但常用的CO2-SFE只适用于提取亲脂性、相对分子质量小的物质，这就给提取环烯醚萜苷成分带来了一定的难度，但随着高压技术和夹带技术的发展，此方法也将得到广泛应用[]。2.环烯醚萜类化合物分离纯化方法2.1大孔吸附树脂法大孔吸附树脂是依靠它和被吸附的分子之间的范德华引力,通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作,使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化等不同目的。根据环烯醚萜苷类的极性范围，一般是选用弱极性或非极性的树脂。姚干等[]，金日显等[]分别采用HPD450大孔吸附树脂以及AB-8型大孔吸附树脂分离纯化栀子总环烯醚萜苷。杨坤等使用HPD100树脂作为吸附剂，采用30%乙醇进行洗脱，分离纯化地黄中的梓醇。李茂星等[]比较10种不同厂家、不同型号的大孔树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分的吸附与解吸附条件，结果显示XDA-1型大孔吸附树脂对其有较好的吸附能力，50%乙醇解吸附快速有效，树脂重复利用度高。2.5阴离子交换树脂法离子交换树脂对溶液中的不同离子有不同的亲和力，对它们的吸附有选择性。张庭广等[]在利用大孔吸附树脂分离地黄中梓醇时，发现大孔吸附树脂很难分离梓醇与糖类，故再利用阴离子交换树脂进行梓醇与糖类的分离，达到了分离、纯化梓醇的目的，为药材中环烯醚萜苷类与糖类的分离、纯化提供了参考数据和方法。2.2柱层析法邱建国等[]应用大孔吸附树脂结合聚酰胺柱色谱法，富集分离独一味中总环烯醚萜类极性成分。该方法分离、富集效果与降低成本都兼顾，有利于工业化生产。李冲等[]在分离蒙古糙苏中的环烯醚萜苷类成分时，用乙醇回流提取之后再用丙酮溶解，粗提物先经聚酰胺柱，不同组分再经反复硅胶柱层析，用不同溶剂洗脱，最后得到得3种环烯醚萜苷类