细胞生物学总复习（副本）.docVIP

1绪论 细胞生物学：从细胞的显微、亚显微和分子三个水平研究细胞结构、功能和各种生命活动规律的科学。由细胞学发展而来。 细胞cell：能进行独立繁殖的有膜包围的生物体的基本结构和功能单位。一般由质膜、细胞质和核（或拟核）构成，是生命活动的基本单位。 细胞学说 cell theory： 1. 认为细胞是有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成； 2. 每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命有所助益； 3. 新细胞可以通过老细胞的繁殖产生； 细胞生物学发展史的主要事件 细胞生物学的历史大致可以划分为四个主要的阶段： 第一阶段：细胞的发现，16世纪末-19世纪30年代。 1590 第一台复式显微镜。 1655 英国Ronert Hooke首次描述了植物细胞，命名为cella。 1674 荷兰A.van Leeuwenhoek发明了世界上第一台光学显??镜,并利用这台显微镜首次观察到了血红细胞，发现细胞核结构。 第二阶段：细胞学说提出，19世纪30年代-20世纪中期。 1838 德国 施莱登、施旺 提出细胞学说。 1855 德国 魏尔肖 提出“一切细胞来源于细胞”，进一步完善了细胞学说。 1879 德国 W. Flemming观察到蝾螈细胞有丝分裂。 1883 比利时 E.van Beneden发现减数分裂。 第三阶段：超微结构研究，20世纪30年代-70年代。 1944 美国O.Avery， C.Macleod和M.McCarthy 证明DNA是遗传物质。 1953 美国J. D. Watson和英国 F. H.C. Crick提出DNA双螺旋模型。 1965 美国 蒋有兴证实人的2n染色体为46条。 1961-1964 美国 M.W.Nirenberg破译DNA遗传密码。 第四阶段：分子细胞生物学，20世纪70年代分子克隆技术出现以来。 1973 美国 S.Cohen和H.Boyer将外源基因拼接在质粒中，在大肠杆菌中表达，揭开基因工程的序幕。 1975 英国 F.Sanger设计出DNA测序双脱氧法。 1975 德国G.J.F.Kohler，阿根廷C.Milstein 丹麦N.K.Jerne发展单克隆抗体技术。 或： 五个时期，细胞质的发现、细胞学说的建立、细胞学的经典时期、实验细胞学时期、细胞生物学时期 2细胞生物学研究方法 分辨力resolution：又称分辨本领，指将临近两点清晰区分辨认的能力，分辨物体最小间隔的能力。 原代培养primary culture：培养直接来自动物机体的细胞群。 细胞株cell strain：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。 细胞系cell line：从肿瘤细胞培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，可无限繁殖。 克隆clone：亦称无性系。只有同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。 光学显微镜（正置、倒置、荧光）、电子显微镜（扫描、透射）的成像原理 光学显微镜：利用凸透镜的成像原理，由目镜与物镜共同组成光学成像系统。 倒置inverse microscope：物镜（载物台下）与照明系统（载物台上）颠倒。 荧光fluorescence microscope：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜。有两个特殊的滤光片。照明方式通常为落射式。 电子显微镜： 透射transmission electron microscope，TEM：D=0.2mm。以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。 扫描scanning electron microscope，SEM：D=6-10nm。极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。 电镜标本的制备方法 透射电子显微镜TEM：取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、观察。 扫描电子显微镜SEM：取材、清洗、固定、脱水、干燥、镀膜、观察。 激光共聚焦显微镜的原理是什么？ 激光共聚焦显微镜（laser confocal scanning microscope，LCSM）：以单色激光为光源，使样品被激发出荧光，利用计算机进行图像处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。由于照明孔与检测孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于检测孔和照明孔，焦平面以外得点不会