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生物化学习题 第一章 蛋白质化学 1、向1升1mol/L的处于等电点的甘氨酸溶液加入0.3molHCl，问所得溶液的Ph是多少？如果加入0.3mol NaOH以代替HCl时，pH值将是多少？[pH:2.71；9.23] 2、将丙氨酸溶液（400毫升）调节到pH8.0，然后向该溶液加入过量的甲醛。当所得溶液用碱反滴定至pH8.0时，消耗0.2mol/L NaOH溶液250毫升。问起始溶液中丙氨酸的含量为多少克？[4.45g] 3、将含有天冬酸（pI=2.98），甘氨酸（pI=5.97），苏氨酸（pI=6.53），亮氨酸（pI=5.98）和赖氨酸（pI=9.74）的pH3.0柠檬酸缓冲液，加到预先用同样缓冲液平衡过的Dowex-50阳离子交换树脂中，随后用该缓冲液洗脱此柱，并分部地收集洗出液，这5种氨基酸将按什么次序洗脱下来？[Asp，Thr，Gly, Leu, Lys] 4、指出在正丁醇：醋酸：水的系统中进行纸层析时，下列混合物中氨基酸的相对迁移率（假定水相的pH为4.5）：（1）Ile, Lys; (2)Phe, Ser; (3)Ala, Val, Leu; (4)Pro, Val; (5)Glu, Asp; (6)Tyr, Ala, Ser, His。[IleLys; PheSer; LeuValAla; ValPro; GluAsp; TyrAlaSer≈His] 5、（1）当Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合物在pH3.9进行纸电泳时，哪些氨基酸移向正极（+）？哪些氨基酸移向负极（-）？（2）纸电泳时，带有相同电荷的氨基酸常有少许分开，例如Gly可与Leu分开。试说明为什么？（3）设Ala、Val、Glu、Lys和Thr的混合物pH为6.0，试指出纸电泳后氨基酸的分离情况。[（1）Ala, Ser, Phe和Leu以及Arg和His移向负极；Asp移向正极。(2)电泳时，具有相同电荷的较大分子移动得慢，因为电荷/质量之比较小，因而引起每单位质量迁移的驱动力也较小。（3）Glu移向正极；Lys移向负极，Val, Ala和Thr留在原点。] 6、有一个A肽：经酸解分析得知由Lys、His、Asp、Glu2、Ala、以及Val、Tyr和两个NH3分子组成。当A肽与FDNB试剂反应后，得DNP-Asp；当用羧肽酶处理得游离缬氨酸。如果我们在实验中将A肽用胰蛋白酶降解时，得到二种肽，其中一种（Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr）在Ph6.4时，净电荷为零，另一种（His、Glu、以及Val）可给出DNP-His，在Ph6.4时，带正电荷。此外，A肽用糜蛋白酶降解时，也得到二种肽，其中一种（Asp、Ala、Tyr）在pH6.4时呈中性，另一种（Lys、His、Glu2、以及Val）在Ph6.4时，带正电荷。问A肽的氨基酸顺序如何？[Asn—Ala—Tyr—Glu—Lys—His—Gln—Val] 7、某多肽的氨基酸顺序如下： 。（1）如用胰蛋白酶处理，此多肽将产生几个肽？并解释原因（假设没有二硫键存在）；（2）在pH7.5时，此多肽的净电荷是多少单位？说明理由（假高pKa值：α-COOH4.0；α-NH3+6.0；Glu和Asp侧链基4.0；Lys和Arg侧链基11.0；His侧链基7.5；Cys侧链基9.0；Tyr侧链基11.0）；（3）如何判断此多肽是否含有二硫键？假如有二硫键存在，请设计实验确定5，17和23位上的Cys哪二个参与形成？[（1）4个肽；（2）-2.5单位；（3）如果多肽中无二硫键存在，经胰蛋白酶水解后应得四个肽段；如果存在一个二硫键应得三个肽段并且各肽段所带电荷不同，因此可用离子交换层析、电泳等方法将肽段分开，鉴定出含二硫键的肽段，测定其氨基酸顺序，便可确定二硫键的位置。] 8、今有一个七肽，经分析它的氨基酸组成是：Lys, Gly, Arg, Phe, Ala, Tyr和Ser。此肽未经糜蛋白酶处理时，与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸。经糜蛋白酶作用后，此肽断裂成两个肽段，其氨基酸组成分别为Ala, Tyr, Ser和Gly, Phe, Lys, Arg。这两个肽段分别与FDNB反应，可分别产生DNB—Ser和DNP—Lys。此肽与胰蛋白酶反应，同样能生成两个肽段，它们的氨基酸组成分别是Arg, Gly和Phe，Tyr, Lys, Ser, Ala。试问此七肽的一级结构是怎样的？[它是一个环肽，顺序为—Phe—Ser—Ala—Tyr—Lys—Gly—Arg—] 9、今有一种植物的毒素蛋白。直接用SDS凝胶电泳分析时，它的区带位于肌红蛋白（分子量为16 900）和β-乳球蛋白（分子量为37 100）两种标记蛋白之间。当这个毒素蛋白用巯基乙醇和碘乙酸处理后，在SDS凝胶电泳