七发酵过程控制.PPTVIP

■发酵过程按进行过程有三种方式： 分批发酵(Batch fermentation) 补料分批发酵(Fed-batch fermentation) 连续发酵(Continuous fermentation) （一）分批发酵 是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中，除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外，不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少，微生物得到繁殖。 分批发酵的优缺点 优点 操作简单； 操作引起染菌的概率低。 不会产生菌种老化和变异等问题 缺点 非生产时间较长、设备利用率低。 分批发酵的生长曲线 Gadens fermentation classification（按照菌体生长，碳源利用和产物生成的变化） 第一类型 第二类型 第三类型 ■分批发酵的分类对实践的指导意义 （二）补料分批发酵 1、定义 补料分批发酵又称半连续发酵或流加分批发酵，是指在分批发酵过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的发酵方式。 补料分批发酵的优缺点 优点 使发酵系统中维持很低的基质浓度； 延长发酵周期。 缺点 存在一定的非生产时间； 和分批发酵比，中途要流加新鲜培养基，增加了染菌的危险。 补料分批发酵的类型 补料方式 连续流加 不连续流加 多周期流加 补料成分 单一组分流加 多组分流加 控制方式 反馈控制 无反馈控制 （三）连续发酵 1、定义 培养基料液连续输入发酵罐，同时以相同速度流出培养液，从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。 连续发酵的优缺点 优点 能维持低基质浓度； 可以提高设备利用率和单位时间的产量； 便于自动控制。 缺点 菌种发生变异的可能性较大； 要求严格的无菌条件。 连续发酵的类型 恒化培养 使培养基中限制性基质的浓度保持恒定 恒浊培养 使培养基中菌体的浓度保持恒定 四、间接参数 根据发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、基质浓度和产物浓度等参数的变化值，可分别计算出菌体的比生长速率、氧的比消耗速率、基质的比消耗速率和产物比生产速率。 目前较常测定的参数有温度、罐压、空气流量、搅拌转速、pH、溶氧、基质浓度、菌体浓度等。 不常测定的参数有氧化还原电位、粘度、尾气中的O2和CO2含量等。 参数测定方法有： 在线测定 取样测定（离线测定） 例：青霉菌生产青霉素 青霉菌生长活化能E=34kJ/mol 青霉素合成活化能E=112kJ/mol 青霉素合成速率对温度较敏感，温度控制相当重要。 生物热：生物热是生产菌在生长繁殖时过程中散发的大量热量。 影响生物热的因素： 菌株 培养基 发酵时期 菌体的呼吸强度 搅拌热：通风发酵都有大功率搅拌，搅拌的机械运动造成液体之间，液体与设备之间的摩擦而产生的热 。 Q搅拌=3600（P/V） （P/V）：通气条件下单位体积发酵液所消耗的功率（ kW/m3） 蒸发热：空气进入发酵罐后和发酵液广泛接触,引起水分的蒸发所需的热量即为蒸发热。 蒸发热的计算： Q蒸发=G（I2-I1） G：空气流量，按干重计算，kg/h I1 、 I2 ：进出发酵罐的空气的热焓量，J/kg（干空气） 显热：排气由于温度差异带走的热量 辐射热：由于发酵罐内外温度差，通过罐体向外辐射的热量。 辐射热可通过罐内外的温差求得，一般不超过发酵热的5%。 发酵热的测定 （1）通过测定一定时间内冷却水的流量和冷却水进出口温度，由下式求得这段时间内的发酵热。 （2）通过罐温的自动控制，先使罐温达到恒定，再关闭自控装置测得温度随时间上升的速率S，按下式可求得发酵热： C/N过高（特别是葡萄糖过量）/中间补糖过多/溶氧不足，致使有机酸积累，而pH下降 生理酸性物质被利用，pH下降 酸性产物形成 消泡剂添加过量 C/N过低（N源过多） ，氨基氮释放 生理碱性物质的存在 中间补料，氨水或尿素等碱性物质添加过多 碱性产物形成 发酵后期，菌体自溶造成pH的上升 （1）溶解氧控制的一般原则 生长阶段： 即可 产物合成阶段： 即可 过高的溶氧水平反而对菌体代谢有不可逆的抑制作用 （2）补料控制溶解氧 控制原理 发酵过程中， 糖量↑→ x ↑, QO2 ↑ → r ↑ → CL↓ 糖量 ↓ → QO2 ↓ → r ↓ → CL ↑ 对于一个具体的发酵，存在一个最适氧浓度（Cm）水平，补糖速率应与其相适应。 溶解氧控制对鸟苷产量的影响 CO2对发酵影响的机理 CO2及HCO3-主要是影响细胞膜的结构，导致膜的流动