专题六 生物实验.docVIP

专题复习六 生物实验 一．光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法 镜头：目镜无旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越小；物镜有旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越大。 呈像原理：看到的是倒立放大的虚像。 放大倍数：目镜和物镜二者放大倍数的乘积 注：显微镜放大倍数是指直径倍数，即长度和宽度，而不是面积。 二．显微镜的使用：置镜（装镜头）→对光→置片→调焦→观察 高倍镜的使用。找到物像后，把要观察的物像移到视野中央，把低倍镜移走，换上高倍镜，只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到物像清楚为止。 注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细准焦和反光镜（或光圈）。 放大倍数与视野的关系： 放大倍数越小，视野范围越大，看到的细胞数目越多，视野越亮，工作距离越长； 放大倍数越大，视野范围越小，看到的细胞数目越少，视野越暗，工作距离越短。 移动：物像在何方，就将载玻片向何处移。（原因：物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反） 污点判断：1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上； 污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； 污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。 实验一：观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26） 一．实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法 二．实验原理： 1．甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 2．盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 三．方法步骤： 操作步骤 注 意 问 题 解 释 取口腔上皮细胞制片 载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液，用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞，将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果，保持细胞原有形态，消毒为防止感染，漱口避免取材失败 固定装片 水 解 将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min 改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色 冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在外的盐酸 染 色 滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min ? 观 察 先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察 使观察效果最佳 ?实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18） 一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如： ??????????????????? ?加热??? 葡萄糖+ Cu ( OH ) 2? 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。 3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。） 三．实验材料 1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。） 2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。 3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 四、实验试剂 斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。 五、方法步骤： （一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 ? ? 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70