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红外辅助提取白芨多糖（BSP）的优化基于响应面法及BSP的抗氧化活性 201440302105 赵颖 摘要 BSP由于其潜在的医学应用，而吸引了广泛的研究兴趣。这里，首次采用红外辅助技术从白芨块茎中提取BSP。基于Box-Behnken设计（BBD）和响应面（RSM）方法，在最佳提取条件下：75°C提取温度，2.5 h提取时间;和水料比（53ml / g）（水的体积与药材质量比），获得43.95±0.26％的粗BSP产率。随后，将粗BSP进一步脱色，脱蛋白，冷冻干燥，并通过DEAE-52纤维素柱纯化。 此外，对BSP的微结构和的三螺旋结构进行了表征。傅里叶变换红外光谱也证实了其通过典型峰的多糖表征。还通过超氧化物阴离子自由基清除测定，羟基自由基清除测定，DPPH自由基清除活性和亚铁离子的螯合证明了BSP的显着的体外抗氧化活性。总之，这项研究提供了一种有效的提取BSP（作为有希望的天然抗氧化剂）的技术。 介绍 白芨可以用于促进伤口愈合和治疗消化道粘膜损伤，溃疡，出血，瘀伤和烧伤 近年来，天然多糖已被用于各种生物材料，其中它们表现出生物相容性，低毒性和制药生物医学活性。而由于白芨多糖抗菌、抗炎、抗衰老、抗癌（癌症免疫治疗）和保护作用（针对肾纤维化）等，使白芨多糖备受关注。 此外，在用于药物应用的生物活性材料中，已经报道BSP成功地用作药物和基因的受控递送和组织工程的赋形剂。 BSP优异的可纺性，机械性能和生物相容性使生物纤维的生产成为可能，其潜在应用包括作为组织工程支架和伤口敷料的理想材料。 白芨的组分、分子量和生物活性已被广泛研究。然而，BSP的提取及其抗氧化活性却很少被关注。 介绍 提取方法的研究 目前已经开发了多种用于提取多糖的新技术，包括超临界流体提取，微波辅助提取，酶辅助提取和超声波辅助提取。每种提取方法都有其优点和缺点。如，这些方法需要使用精密设备（微波炉或超临界流体提取系统），并且涉及高成本。同时，它揭示了超声辅助提取方法可能会导致水溶性多糖的一些降解。因此，仍然需要开发简单且低成本的提取方法。 与这些方法相比，红外辅助提取（IRAE）越来越多地应用于从药用植物提取活性成分，具有许多优点，包括较短的提取时间，低提取温度和高提取商;此外，红外辅助提取更容易使用，更廉价和无辐射。本研究集中于BSP的IRAE，使用可商购的红外灯泡作为红外辐射源，以开发有效和经济的提取方法。 介绍 实验优化基于RSM响应面法 RSM已被广泛用于优化许多研究中的过程，包括多糖的提取。基于Box-Behnken Design（BBD）的统计建模旨在用于实现最大多糖产率的响应表面设计。 与其他方法相比，BBD有助于实验的设计和解释，具有广泛的应用范围。而且，据我们所知，在RSM的基础上使用IRAE提取BSP还没有被描述。 因此，在本研究中，通过IRAE（红外辅助）提取BSP，用BBD来优化提取变量以获得最大多糖产率。 响应面分析也是一种最优化方法，它是将体系的响应（如萃取化学中的萃取率）作为一个或多个因素（如萃取剂浓度、酸度等）的函数，运用图形技术将这种函数关系显示出来，以供我们凭借直觉的观察来选择试验设计中的最优化条件。 实验流程 实验优化设计——单因素设计 实验优化设计——BSP冻干技术 冻干可用于保留样品的天然结构和特征。因此，该方法广泛用于干燥多糖样品。 为了便于比较，在本研究中，BSP使用冻干和风干进行干燥。 与以前的报道一致，真空干燥和冻干后BSP的外观差异很大。就本研究中所发现的，BSP的粘度随着浓度增加而增加，使得其容易粘附到容器上并形成干燥的真空薄膜。在高浓度下BSP冻干形成胶状团块，表明BSP具有良好的成膜性质。然而，随着干燥时间的要求，这些团块难以再溶解。而且，冻干的BSP表面结构不同于真空干燥BSP的表面结构，其结构相对薄和松散，并且有一些小碎片粘黏在上面。 因此，为了保证冷冻干燥样品的质量，减少干燥时间和提高效率，在此使用冷冻干燥法制备BSP。 实验优化设计——粗BSP的制备和纯化 BSP的微结构表征结果——冻干BSP的SEM观察 如图，所有样品表现出松散的丝状网络，尽管根据浓度存在大的差异。显微组织如图。 图A表示，出了大的絮状结构。 在图B中，看到带和宽丝。 图C所示，观察到片状结构。 随着薄片结构增加（图D）BSP几乎形成薄膜层。 然而，随着膜层数量的增加，形成了网状结构（图E） 图F中，网格数增加，网格的尺寸减小。网状结构的规则性和密度说明冻干的BSP在无水状态下表现出强烈的相互作用。在网络结构中观察到一些角度不规则的空隙，这些空隙可能代表在冷冻干燥过程中冰晶升华后残留的空间。 BSP的多糖结构表征结果—— BSP的FT-IR光谱 BSP的多糖构象表征结果——刚果红法 刚果红与三螺旋多糖反应，将溶