血球计数板实验讲述.ppt

血球计数板 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.? 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见上图????? 血球计数板的使用 以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.?(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.?(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 3.计算公式（1ml菌液）(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止. 土壤丰富度的研究 例1 某生物兴趣小组准备对所处地区的花园和菜地土壤中小动物类群的丰富度进行研究。假定你是其中的一员，请回答： （1）提出你们小组要探究的问__________________； （2）进行这类调查常采用________法，而不适用________法，原因是__________________； （3）丰富度的统计方法通常有记名计算法和_____________，前者一般适用于_____________的群落； （4）对土样中的小动物进行采集时，在诱虫器上方通常要放置并打开40～60W的电灯，这样做的目的是________________，采集到的小动物可以放入?_________溶液中保存，也可以放入_________中。 （5）在观察和分类的基础上，若要用记名计算法对两类土壤中的动物进行统计和分析，请你设计一个数据统计表： 要探究的问题：__________________。 （5）××地区花园和菜地土壤中小动物类群的丰富度统计表 ? ? ? ? ? ? ? ???????????? ??????????? 例2 某校生物兴趣小组计划对A草地进行下列研究。甲同学在记录进行“探究土壤中小动物类群丰富度”研究计划时，遗漏了下列问题，请你帮助补充完成 一、适合大多数土壤动物的取样方法是：__________________?。 二、对土壤动物的统计方法是：__________________?。 三、仪器药品用具：除放大镜、镊子、花铲、塑料袋、纱布、70％酒精外，还需要?_________________。 四、实施步骤：取样→采集小动物→_________→统计和分析。 (1)在采集小动物时，对体型较大的可用_________ 取出。对体型较小的可用__________________?采集。 (2)设计一个数据收集和统计表： 一、实验原理： 土壤不仅为植物提供水分和矿质元素，也是一些动物的良好栖息场所。研究土壤中动物类群的丰富度，操作简便，有助于理解群落的基本特征与结构。 二、实施计划： 本研究包括三个操作环节：取样、观察和分类、统计和分析。 （1）取样： （2）采集小动物：使用诱虫器取样，比较方便，时间可能要长一些。也可采用简易采集法：可用包着纱布的镊子取出；体形较小的动物可用吸虫管采集。采集到的小动物可放入酒精中，也可将活着的小动物放入试管中。 （3）观察和分类 （4）统计和分析：“统计