利用啤酒和精废水开发微生物发酵培养基及其应用研究.doc

利用啤酒和味精废水开发微生物发酵培养基及其应用研究 学院：生命科学学院 年级： 2008级 专业：食品科学与工程 指导老师：杨小兰 姓名：赵立 学号： 2008314038 摘要：利用啤酒和味精废水.经稀释添加某些成分后，成功研制出微生物发酵培养基。比较研究了真菌、细菌和链霉菌(生物农药生产菌)利用食品工业废水发酵培养基的可能性。结果表明，井冈霉素菌和阿维菌素菌不能利用废水培养基，分离、保存的特异灰色链霉菌西藏变种TAS-1和代号为HX-0501乳黄色细菌能利用废水发醉培养基。经生物测试，其发酵代谢产物对多种病原真菌具有很高的拮抗作用。该研究为利用食品工业废水生产生物农药微生物处理废水及废物再生利用找到了一条新的途经。 关键词:食品工业废水 发酵培养基 微生物 生物农药 1概述 我国是世界第一大啤酒和味精生产国：2005年产啤酒3189/104t，每生产It啤酒平均排出约15m，废水，目前每年生产啤酒产生的废水在47835/104t以上。目前我国味精产量约130x104t。每年生产味精排出的废水达3250xl04t左右。啤酒发酵废水中主要污染因子是化学需氧量、生化需氧量和悬浮物，其浓度含量为化学需氧量1000一2500mg/L生化需氧量1500mg/L、悬浮物300-600mg/L、TN30-70mg/L(不同厂家浓度不同),pH值为4.5-7.0(显微酸性)。味精废水中化学需氧量含量高达(4-8)*10000mg/L、生化需氧量(2-3)*10000mg/L、悬浮物为(l-2)*10000mg/L、菌体1.0%-15%、总氮约1.0%。味精废水中有机物含量较高，有大量的氨态氮和硫酸根等，pH约3.0-3.4，是高浓度酸性有机废水。生产啤酒和味精的原料主要是谷物类粉、蛋白质、氨基酸等，其产生的废中含有大量的淀粉、植物蛋白和氨基酸等营养物质。这些废水如不能得到很好处理就直接排放，将对生态环境造成严重污染，同时也浪费了大量资源。TAS-l是从西藏高原土壤中分离到的l株特异灰色链霉菌，其活体和代谢产物对多种病原真菌具有极强的拮抗作用;AA、CL菌是稗草生防潜力菌禾长蠕抱菌改良的优异特性的供体菌，同时也是开发真菌蛋白农药的原始菌种 以啤酒、味精发酵废水为主要成分，添加少量其他元素研制成发酵培养基，一些特异的真菌、细菌和链霉菌能有效利用这些发酵培养基进行发酵培养，产生菌丝团或发酵代谢产物。TAS-1和HX-0501发酵原液及稀释10倍、50倍后，对多种病原真菌具有很好的研制效果。过去废水处理主要依靠机械、物理及化学的方法。近年来，随着科学技术的进步，一些经济、高效、生态、可再生利用的生物处理废水的技术得到开发并逐步应用到实际中去。在味精废水生物处理中，主要是利用味精废水研制发酵培养基发酵培养苏云金芽抱杆菌(B.t)生产生物农药。在利用废水培养微生物进而处理废水方面国内已有一些研究报道，有人在利用啤酒废水养殖螺旋藻、培养单细胞蛋白(SCP)方面作过尝试;在利用味精废水培养微生物方面主要集中在培养、驯化苏云金芽抱杆菌B.t菌株，达到既处理废水又生产生物农药的目的。 本研究试图利用啤酒、味精工业废水作为主要成分研制微生物发酵培养基发酵培养真菌、细菌和链霉菌。达到既处理废水又能利用废物、培养目标菌生产生物农药的目的。 2材料和方法 2.1材料 2.1.1发酵菌种灰色链霉菌西藏变种、交链抱菌、弯抱菌。HX-0501(乳黄色细菌，未鉴定)、井冈霉素菌、阿维菌素菌。 2.1.2供测病原菌稻瘟病菌、纹枯病菌、稻叶鞘腐败病菌、稻恶苗病菌、兰花炭疽病菌等。井冈霉素菌、阿维菌素菌分别由浙江桐庐汇丰生物化工有限公司和浙江升华拜克生物股份有限公司提供外，其他菌种均为本研究室分离保存。 2.1.3培养基质啤酒废水培养基、味精废水培养基、马铃薯蔗糖(葡萄糖)培养基(PD)。 2.2方法2. 2.1废水培养基的制备 2.2.1.1 PD发酵培养基:按200g去皮马铃薯在1000mL水中煮沸后再煮15一20min，加人189蔗糖或葡萄糖即可。 2.2.1.2 啤酒废水培养基:按啤酒废水与水体积比为1:4.5-5.5进行稀释，调节值至6.5-7.2，葡萄糖或蔗糖1.0%-2.0%(g/mL)、尿素1.0%-2.0%(g/mL)、，以及常用和常规量的无机盐、微量元素。 2.2.1.3 味精废水培养基:按味精废水与水体积比为l:4-6进行稀释，调节pH值至6.5-7.2，葡萄糖或蔗糖1.5%一2.0%(g/mL)、淀粉2.0%一3.0%(g/mL)、，以及常用和常规量的无机盐，添加量为0.1%-0.15%(g/mL)、微量元素维生素C、,添加量为0.03%-0.05%(g/mL)。 2.2.2 保存在冰箱中的上述各菌种移人PDA平板培养基上培养5一6d备用。啤酒、味精废水培养