實验四革兰氏染色法.pptVIP

实验四 革兰氏染色法 一 目的要求： 1、学习并掌握革兰氏染色法。 2、了解革兰氏染色法的原理。 3、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。 二、实验器材： 1.菌种： 大肠杆菌16h牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物、金黄色葡萄球菌16h牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。 2.溶液或试剂： 革兰氏染液，草酸铵结晶紫染液，lugol碘液，95%乙醇，番红复染液等。 3.仪器或其他用品： 酒精灯、载玻片、显微镜、双层瓶、擦镜纸、接种环、试管架，镊子，载玻片夹子，滤纸、滴管和无菌生理盐水等。 三、实验原理： 1、无菌操作技术： 高温对微生物具有致死效应，因为在微生物的转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫死微生物。 2、细菌制片： 涂片法： 涂抹——细胞个体在载玻片上均匀分布，避免菌体堆积而无法观察个体形态。 加热——固定使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上，这种加热处理还可以杀死大多数细菌而且不破坏细胞形态。 3、革兰氏染色： 革兰氏染色是丹麦医生Hans Christian Gram于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。 细菌对革兰氏染色的不同反应是由于它们细胞壁的结构和组分的差异所决定的。 初染——所有细菌都被染成结晶紫的蓝紫色。 碘——媒染剂，与结晶紫结合成结晶紫—碘的复合物