7.2 微生物染色及形态学检查技术.ppt

7.2 微生物形态学检查法;1. 不染色标本检查;1.1 悬滴法;1.2 压滴法;2. 染色细菌标本检查法;2.1.1 细菌染色的基本程序;（1）涂片制备;涂片;2.1.2 基本的染色方法;2.2 微生物染色的一般原理;（2）吸附作用 较大物体有从周围介质吸附小颗粒到自身的特性 有些染色则是染色剂分子通过渗透和毛细管作用而被吸收或沉淀到细胞的小孔中去而着色的 例如活性炭吸附各种分子，甚至胶质和微生物等较大的颗粒一样 ;2.2 微生物染色的一般原理;;2.2.3 直接染色、间接染色和媒染剂;2.2.4 染色技术的学习要求;2.2.5 常用染料;3. 革兰氏染色;革兰氏染色原理;革兰阳性菌细胞壁特殊组分;革兰阴性菌细胞壁特殊组分;革兰氏染色法; 3.媒染— 碘-碘化钾溶液浸湿30S ;G+菌;Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells. ;注 意 事 项;革兰染色的临床意义 （了解）;思考：;革兰染色结果;4. 抗酸染色;抗酸染色原理;常用的抗酸染色方法;抗酸染色的改良方法;;;5 细菌荚膜的染色;5 细菌荚膜的染色;6 枯草杆菌芽孢的染色;6 枯草杆菌芽孢的染色;补充知识：细菌的基本形态和特殊结构观察;细菌基本形态－球菌;细菌基本形态－杆菌;细菌基本形态－弧菌;细菌特殊结构－芽胞;细菌特殊结构－荚膜;细菌特殊结构－鞭毛;1、美蓝染色法 （一）吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30ml 0.01%氢氧化钾溶液 100ml 将美蓝溶解于乙醇中，然后于氢氧化钾溶液混合 （二）染色法 将涂片在火焰上固定，待冷却后滴加染液，染 1min~3min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 菌体呈蓝色 ;2、革兰氏染色法 （一）染色液 a、洁净紫染色液 结晶紫 1g 95%乙醇 20ml 1%草酸铵水溶液 80ml 将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 b、革兰氏碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，在加蒸馏水至300ml。 ;c、沙黄复染法 沙黄 0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml 将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。 ;3、耐酸性染色法（萎—倪二氏法） （一）染色液 a、石炭酸品红染色液 碱性品红 0.3g 95%乙醇 10ml 5%苯酚水溶液 90ml 将品红溶解于乙醇中，然后与苯酚溶液混合。 b、3%盐酸-乙醇 浓烟酸 3ml 95%乙醇 97ml c、复染液 吕氏碱性美蓝染色液 ;;5、奥尔特氏荚膜染色法 （一）染色液 沙黄 3g 蒸馏水 100ml 用乳钵研磨溶解 （二）染色法 将涂片在火焰上固定，滴加染色液，并加热至产生蒸汽后，继续染3min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 炭疽芽孢杆菌菌体呈赤褐色，荚膜呈黄色。 ;6、瑞氏染色法 （一）染色液 瑞氏色素 0.1g 甲醇 60ml 用乳钵研磨溶解 （二）染色法 a、待涂片自然干燥后，滴加染色液，固定1min。 b、加入等量蒸馏水（pH6.5），染色3min~5min。 c、用蒸馏水冲洗，待干，镜检。 ;7、鞭毛染色法 （一）染色液的配制 a、甲