020细胞工建-第二章清洗与消毒.ppt

培养用品的清洗和消毒灭菌 一、清洗： 在组织培养中细胞对任何有害物质都十分敏感，因此对新的或用过的培养器皿均需严格清洗。 有害成分大多为：微生物、细胞碎片、非营养性化学成分。 1.玻璃器皿清洗： 玻璃器皿用于培养细胞、细胞冻存、培养用液的存放等。提供细胞生长的玻璃表面不但要清洗干净，而且要带适当的电荷。 苛性碱清洗剂会使玻璃表面带的电荷不适于细胞附着。需以HCl或H2SO4中和。 一般玻璃器皿的清洗分为4个步骤。 A：浸泡：首先清水浸泡，用以软化和溶解；再采用5%盐酸浸泡过夜； 新的玻璃器皿在生产过程中常使玻璃表面呈碱性，并带有一些如铅和砷等对细胞有毒的物质，采用酸处理可消除。 B:刷洗：一般多用毛刷和洗涤剂或洗衣粉洗涤，以去除器皿内外表面的杂质（防止损伤器皿表面，不留死角）。 C:浸酸：清洁液由浓硫酸、重铬酸钾及蒸馏水配制而成。具有很强的氧化作用，去污能力很强，对玻璃器皿无腐蚀作用。 清洁液：红棕色（有效）--绿色（失效） D：冲洗：玻璃器皿经浸泡后，第一步，使用流水彻底冲洗，每个器皿用流水灌满、倒掉，须重复十次以上，直至清洁液全部冲洗干净，不留任何残迹为止。 细胞培养物品清洗所需配制的清洁液强度通常为次强液。新配制的清洁液呈棕红色，经多次使用、水分增多或遇有机溶剂时变为绿色，此时表示清洁液已失效，应废弃而重新配制。 安全：配制过程中，应先将重铬酸钾完全溶解于蒸