分子印迹技术在中药研究中的应用.doc

分子印迹技术在中药提取分离中的应用 作者：张雅雯（1985.10-），本科，药师，邮箱： HYPERLINK mailto . 通讯地址：广州市天河区金穗路9号广州市妇女儿童医疗中心门诊2楼西药房 张雅雯 （广州市妇女儿童医疗中心，广东 广州510623） 摘要：综述了分子印迹技术的原理、分类、制备以及在中药分离纯化中的应用，并对其面临的问题及应用前景进行了展望。 关键词：分子印迹技术；分子印迹聚合物；中药；分离提取 分子印迹技术(Molecular Imprinting Technique，MIT)是获得在空间和结合位点上与模板分子完全匹配的聚合物的制备技术，这种技术的基本思想源于人们对抗体-抗原专一性的认识，利用具有分子识别能力的聚合物材料——分子印迹聚合物(Molecular Imprinting Polymer，MIP)来分离、筛选、纯化化合物的一种仿生技术[1]。自1949年Dickey提出了“分子印迹”这一概念[2]，20世纪90年代Wulff研究小组利用酶和抗体具有分子形状、空间结构选择性的特点，发展了用于色谱手性拆分的MIP，使这方面的研究产生了突破性进展。由于MIP具备的高选择性和特异性识别能力，以及物理化学性质稳定、耐酸碱、抗高压、使用寿命长等特点，使这一技术在固相萃取剂、模拟酶催化、化学传感器、农残分析、环境监测、药物的提取分离与控释等方面得到广泛的应用。笔者现主要对MIT在中药分离纯化中的应用作一综述。 1 分子印迹技术 1.1 原理及分类 根据分子印迹聚合物与模板分子在聚合过程中相互作用的机理不同，分子印迹技术可分为预组装法、自组装法和结合法。 （1）预组装法：又称共价法，该方法主要由Wulff等创立[3]。应用预组装法合成MIP过程中，模板分子通过可逆的共价键与功能单体结合，加入交联剂形成聚合物后，模板分子通过破坏共价键的方式而被去除。这类MIP的选择性与交联剂的用量直接相关，但由于可逆性共价反应的限制，能够利用这种方式制备MIP的模板分子非常有限，因此预组装法发展较为缓慢。 （2）自组装法：又称非共价法，目前MIP的制备多数采用这种方法。模板分子和功能单体通过通过氢键、偶极作用、离子化作用、金属配位键、疏水作用、静电作??、范德华力等多种非共价键作用力生成分子自组装体[4]，在加入交联剂形成聚合物后，这种复合物被保留下来。大多数化合物都能够通过非共价作用与功能单体结合，因此，自组装法具有更广阔的应用前景。 （3）结合法：又称半共价法，是将共价键印迹和非共价键印迹相结合的一种印迹方法[5]。结合法最早是由WHITECOMB领导的研究小组于1995年提出[6]，在此方法的基础上WULFSON领导的研究小组又提出“牺牲空间法”[7]，其实质仍然是预组装法和自组装法的结合法。在MIP制备过程中，模板分子和功能单体通过共价键形成复合物，在去除模板分子后，目标分子与分子印迹物通过非共价的相互作用而被特异性识别。这种方法制备的MIP不但具有专一性强的特点，并且在动力学上能快速平衡，结合了共价合成法和非共价合成法的双重优势。 1.2 MIP的制备方法 根据分子印迹聚合物的用途和不同性能要求，可以选择多种MIP制备方法，主要包括本体聚合、悬浮聚合、沉淀聚合、表面印迹法等方法。 （1）本体聚合，是将模板分子、功能单体和交联剂按一定比例混合于致孔剂中，经聚合形成MIP，再由机械研磨成所需要尺寸的粒子。这种方法制备的MIP对模板分子仍能保留良好的识别能力和选择性，并且合成过程易于控制，不需要特殊复杂的仪器设备，便于普及。朱林敏研究小组[8]采用本体聚合法首次合成了丹酚酸A分子印迹聚合物，并优化了最佳的聚合条件。在甲醇溶液中，利用静态平衡吸附实验和Scatchard 模型评价了丹酚酸A分子印迹聚合物的吸附特性。结果表明，在所考察的浓度范围内，与空白聚合物相比，丹酚酸A分子印迹聚合物对丹酚酸A有较高的吸附量，且丹酚酸A分子印迹聚合物中形成了2类不同的结合位点。 （2）悬浮聚合，一般由有机单体、乳化剂、引发剂以及水组成，具体过程是：向混合有模板分子、功能单体以及交联剂的溶液中加入乳化剂和交联剂后，在水中聚合形成较均一的球状聚合物。为提高香草醛的提取和使用价值，丁俊红等[9]以香草醛为模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，二甲基丙烯酸乙二醇酯（EDMA）为交联剂，采用紫外辐照引发悬浮聚合制备了香草醛MIP微球，辐照引发悬浮聚合制备的印迹聚合物具有较均匀的粒径分布和良好的等温吸附性能，并且表现出良好的特异吸附性能，MIP对于香草醛及邻香草醛的分离因子为2。 （3）沉淀聚合，是一种非均相溶液聚合。其原理是生成的MIP在溶剂中彼此分散，当MIP在溶剂中达到饱和时，会产生相分离，最终获得粒径均