基因重排.ppt

第十章 基因的表达与调控(下) —真核基因表达调控的一般规律;真核生物的基因组 真核生物基因表达调控的特点和种类 真核生物DNA水平上的基因表达调控 真核生物转录水平上的基因表达调控 真核基因转录后水平上的调控;一、真核基因组结构特点;● 基因组很小，大多只有一条染色体 ● 结构简炼 ● 存在转录单元多顺反子 ● 有重叠基因 ;二、真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在以下几个方面的差异 ;① 在真核细胞中，一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链，很少存在原核生物中常见的多基因操纵子形式。 ;③ 高等真核细胞DNA中很大部分是不转录的，大部分真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子。; ⑤在真核生物中，基因转录的调节区相对较大，它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基对，这些调节区一般通过改变整个所控制基因5’上游区DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。 在原核生物中，转录的调节区都很小，大都位于启动子上游不远处，调控蛋白结合到调节位点上可直接促进或抑制RNA聚合酶与它的结合。;⑥ 真核生物的RNA在细胞核中合成，只有经转运穿过核膜，到达细胞质后，才能被翻译成蛋白质，原核生物中不存在这样严格的空间间隔。;第二节 真核生物基因表达调控的特点和种类;转录后水平的调节;根据其性质可分为两大类：;第三节 真核生物DNA水平上的基因表达调控;一、基因丢失;二、基因扩增;基因组拷贝数增加，即多倍性，在植物中是非常普遍的现象。基因组拷贝数增加使可供遗传重组的物质增多，这可能构成了加速基因进化、基因组重组和最终物种形成的一种方式。;DNA含量的发育控制 利用流式细胞仪对从拟南芥不同发育阶段的组织中分离到的间期细胞核进行分析，发现多倍体的DNA含量与组织的成熟程度成正比。对于一给定的物种，C是单倍体基因组中的DNA含量。;将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录，这种方式被称为基因重排。 通过基因的转座，DNA的断裂错接而使正常基因顺序发生改变。 重排可以产生新基因，而这些基因的表达是特定环境下所必需的。 ???排也许负责从先前存在的一条基因的表达转换到另一条基因的表达，这种方式提供了基因表达调控的一种机制。 通过基因重排调节基因活性的典型例子是免疫球蛋白结构基因的表达。 ;重链和轻链组合在一起，产生具有数个独立结构的免疫球蛋白;免疫球蛋白基因定位;重链可变区基因是由V、D、J三种基因片段经重排后所形成。;;;;重排机制; V/（D）/J重组酶识别与Ig基因片段重排有关的特殊序列，称为重组信号序列(RSS)，位于V基因片段的3‘端与J基因片段的5’端之间以及D基因片段的两侧。;（1）高度保守的回文结构的七聚体（palindromic heptamer); （2）较少保守、富含A/T的九聚体(nonamer); （3）七聚体和九聚体之间不保守的间隔序列（spacer sequence)， 含有12±1碱基对或23±1碱基对。;;;四、DNA的甲基化与基因调控：; DNA甲基化修饰过程通过改变基因的表达，参与细胞的生长、发育过程及X染色体失活等的调控。 DNA甲基化主要形成5-甲基胞嘧啶(5-mC)和少量的N6-甲基腺嘌呤(N6-mA)及7-甲基鸟嘌呤(7-mG)。;DNA的甲基化;在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG序列、CpXpG、CCA/TGG和GATC中 ;真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性：;日常型甲基转移酶—— 作用于仅有一条链甲基化的DNA 双链, 使其完全甲基化, 可参与DNA 复制双链中的新合成链的甲基化。 从头合成型甲基转移酶, 它可甲基化CPG, 使其半甲基化, 继而全甲基化。从头甲基转移酶可能参与细胞生长分化调控, 其中DNM T3b在肿瘤基因甲基化中起重要作用。;;2、DNA甲基化抑制基因转录的机理;;五、染色质结构与基因表达调控：; 真核细胞中基因转录的模板是染色质而不是裸露的DNA，因此染色质呈疏松或紧密结构，即是否处于活化状态是决定RNA聚合酶能否有效行使转录功能的关键。; 一个灯刷染色体正在转录; 灯刷和多线染色体这些性质表明了一个普遍的结论：为进行转录，遗传物质需要从更致密包装的状态变为松散状态。;RNA聚合酶在到达与组蛋白八聚体缠绕在一起的DNA时，可能会遇到阻力。; 基因转录前染色质必须历经结构上的改变，即转换核小体中的全部或部分并重新组装，这个耗能的基因活化过程称为染色质重建。;如果核小体在启动子处形成（RNA聚合酶）就不能结合；如果转录因子（和RNA聚合酶）结合于启动子，并建立了用于起始的稳定复合体，则组蛋白就被排斥在外。;染色质转录的动力学模型依赖于一些因子，它使用由ATP水解