PI3KAKT信號传导通路对鼻咽癌转移的影响.PPTVIP

PI3K/AKT信号传导通路对鼻咽癌转移的影响;一、 研究意义及国内外研究现状;恶性肿瘤的转移机理研究 ;;PI3K的结构简介;AKT结构简介;PI3K/AKT通路的激活;最后 在PDK1的直接或间接催化下 催化AKT结构域的THR308位点 再在LK即整合素连接激酶的 作用 下催化羧基端尾区的SER473位点 也发生磷酸化 最终 AKT充分活化;生长因子，癌基因;活化的AKT BAD磷酸化 凋亡受抑 活化核转录因子 c－myc表达 Bcl-2表达 细胞存活生长 ;;; 另有蒋虹等人研究结果显示AKT蛋白表达与食管癌的临床病理分期，淋巴结转移，分化程度相关，2－3期无淋巴结转移，高分化食管癌组织AKT蛋白表达低于3－4期，有淋巴结转移，低分化食管癌，证实AKT有促进食管癌细胞黏附，侵袭，转移的作用。 Arboleda发现同样的事件于卵巢癌，乳腺癌中。 ; 由此假设PI3K/AKT在鼻咽癌中存在并过表达于发生淋巴结转移鼻咽癌组织中 ，其与转移相关。; AKT促进细胞侵袭和转移的机制 ;3、经PI3K/AKT/mTOR途径，上调MMP－2mRNA和蛋白质表达。 4、活化的AKT能够增加NF－kB的转录活性，使MMP－9产量增加且细胞运动增强，有助于癌细胞转移；NF－kB还能上调COX－2的表达，有助于细胞侵袭的发生。 ;5、用表达构建的活性AKT转染的鳞状上皮细胞癌细胞株中，E－钙粘素表达下调，增加了细胞的运动性. ;6、 JIANG对该通路的研究发现，正常血管生成需要PI3K/AKT途径。VEGF的mRNA水平在有活性的PI3K或AKT表达的细胞明显升高，这种升高的水平能被PI3K抑制剂LY294002所降低，提示PI3K在血管生成及调节VEGF表达方面起重要作用。;AKT促进血管生成的可能机制 ;;二、创新之处 ;四、研究目标 研究内容 拟解决关键问题;研究内容： 1、 研究临床标本，鼻咽癌及有淋巴结转移鼻咽癌中p-AKT,PI3K的表达情况，从该通路的关键激酶,及下游P70S6K，蛋白表达，分析该通路是否在转移癌中过表达。 ;2、 复苏和培养的低转移鼻咽癌细胞株CNE－2Z及高转移CNE－2Z－H5－9鼻咽癌细胞株，同时给予另一组高转移CNE－2Z－H5－9鼻咽癌细胞株PI3K/AKT通路的阻滞剂。分别检测三组肿瘤细胞黏附能力和侵袭能力。 ;3、 用阻滞剂阻滞CNE－2Z－H5－9中该通路及观察细胞运动能力的变化以便探讨该通路对促癌转移作用。 ;拟解决的关键问题： ?????1? 鼻咽癌转移是否同PI3K/AKT通路有关。 ? 2 PI3K/AKT通路拮抗剂对鼻咽癌转移的影响。 ;五．拟采取研究方法;3 Western－blot检测CNE－2Z及CNE－2Z－H5－9中PI3K，P70S6K，pAKT，的表达。 RT－PCR检测P－AKT PI3K VEGF的mRNA的水平。 ELISA检测P－AKT，PI3K ，MMP－2 的表达 ;4 Transwell检测通路阻滞后细胞运动能力。 ;六: 技术路线图－临床病理部分;实验病理部分;七、可行性分析;八．预期结果 金费预算 和进度安排;?? ;金费预算 1、 免疫组化：2000元 2、 RT－PCR：2000元 3、 Western－Blot:1400元 4、 ELISA： 4000元 5、 Transwell：2000元 总计：11400元 ;进度安排： 2005．11. 1－2006. 1. 1 细胞培养 2006. 1. 1－2006. 12. 1 细胞实验部分 2006. 12. 1－2007. 2. 1 免疫组化部分 2007. 2. 1－2007. 4. 1 数据整理分析，论文撰写，申报成果。 ;请各位老师批评指正 谢谢大家！