PCR聚合酵素連鎖反應.doc

PCR聚合酵素連鎖反應 姓名：張淳堯 老師：陳婷婷 班級：畜三 實驗目的 利用聚合酵素連鎖反應來大量複製所需的ＤＮＡ片段。利用範圍如: (1)從基因中擴增出特定的DNA片段 (2)製造DNA探針 (3)進行DNA突變 原理 變性(利用高溫變性讓雙股拆開 約95?C 3分鐘) 連接(此時降低溫度讓份開的雙股可以各自連接複製 約55?C 30秒) 延展(再恢復之前動作升高一些溫度一直重複就可擴增 約72?C 20秒) 材料 細菌質體(plasmid)DNA(作為模板DNA)、TaqDNA酵素、引子、dNTP、10*PCR緩衝溶液及滅菌純水，聚合酵素連鎖反應器、0.2毫升薄壁微量離心管、微量吸管器(micropipette)、微量吸管(tip)、耐酸鹼和溫度實驗用手套。 方法 用滅菌純水適當稀釋DNA溶液和引子備用。取微量離心管配PCR溶液，依序加入滅菌純水、10*PCR緩衝溶液、dNTP、質體DNA溶液 、引子及TaqDNA酵素，均勻混合後至於離心機短暫離心，使混合溶液居基於反應管之底部，移入PCR反應器設定條件進行反應，結束後取出PCR產物進行膠體電泳分析。 PCR溶液配製 滅菌純水 7.1μl 10