分子生物学-张晓东-细胞培养.pptVIP

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细胞培养;基本概念;细胞系:原代细胞经第一次传代后,形成的细胞群体,即具有增殖能力,类型均匀的培养细胞,一般为有限细胞系。 细胞株:细胞系经过克隆或其他方法而得的单一类型的细胞群体。 原代培养后得到细胞系,再经多次传代培养后,一部分细胞死亡,一部分细胞继续生长并转化为连续细胞系或无限细胞系。 ;细胞培养的种类;常用细胞株的种类;基本条件;;;;;;;;动物细胞培养的特殊性 1、大多数哺乳动物细胞只有附着在固体或半固体的表面才能生长。 2、动物细胞对于营养要求更加苛刻,除氨基酸、维生素、盐类、葡萄糖或半乳糖外,还需要血清。 3、对于培养环境的适应性更差,对环境极其敏感,包括 pH 、溶解氧、温度、剪切力等都比微生物有更高的要求,一般需严格监控。 4、动物细胞生长缓慢,因此培养时间较长。对环境的影响又比微???物为大,因此常用空气、氧、二氧化碳和氮的混合气体进行供氧和调节pH。 ;培养细胞的生存环境 1.环境无毒和无菌; 2.适宜的温度;人和哺乳动物培养细胞最适温度均为35-37℃。 3.气体环境和氢离子浓度;需要一定量的O2(1995-9975pa)和CO2(95%空气+5%CO2);pH7.2-7.4 4.渗透压;260-320mOsm/kg适用于大多数细胞 5.营养物质;六碳糖是主要的能源物质,还需要12种基本氨基酸和谷胺酰胺等 ;细胞培养方法;无菌技术 ;细胞培养的应用——体外观察基因的功能;单克隆抗体制备

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