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【高考总动员】2016届高三生物一轮复习:名师讲堂4【高考总动员】2016届高三生物一轮复习:名师讲堂4.ppt
菜 单 高考总复习·生物 菜 单 高考总复习·生物 名师讲堂(四)
同位素示踪法在高中生物实验中的应用
[知识精要]
同位素用于追踪物质运行和变化过程时,叫示踪元素。用示踪元素标记的化合物,化学性质不变。人们可以根据这种化合物的放射性,对有关的一系列化学反应进行追踪。这种科学研究方法叫做同位素标记法。下面为高中生物学教材中涉及的同位素标记类型。
(1)标记某元素,追踪其转移过程。如在光合作用中,分别用18O标记H2O和用14C标记CO2,以追踪18O和14C的转移途径:
①14CO2→14C3→(14CH2O);
②HO→18O2。
(2)标记特征元素,探究化合物的作用。如噬菌体侵染细菌实验:
①用32P标记DNA,证明DNA是遗传物质。
②用35S标记蛋白质,证明蛋白质外壳未进入细菌体内,推测蛋白质不是遗传物质。
(3)标记特征化合物,探究详细生理过程。如:
①3H标记亮氨酸,探究分泌蛋白的合成、加工、运输过程。
②15N标记DNA,证明了DNA的半保留复制特点。
③分别用3H标记胸腺嘧啶和尿嘧啶,可以用来探究DNA和RNA的复制、RNA的逆转录、基因的表达(转录和翻译)等。
[典例剖析]
科学家以大肠杆菌为实验对象,运用同位素示踪技术及密度梯度离心方法进行了DNA分子复制方式的探索实验,实验内容及结果如表。
组别 1组 2组 3组 4组 培养液中唯一氮源 14NH4Cl 15NH4Cl 14NH4Cl 14NH4Cl 繁殖代数 多代 多代 一代 两代
培养产物 A B B的子Ⅰ代 B的子Ⅱ代 操作 提取DNA并离心 离心结果 仅为轻带(14N/14N) 仅为重带(15N/15N) 仅为中带(15N/14N) 1/2轻带(14N/14N) 1/2中带(15N/14N)
请分析并回答:
(1)要得到DNA中的N全部被放射性标记的大肠杆菌B,必须经过________代培养,且培养液中的________是唯一氮源。
(2)综合分析本实验的DNA离心结果,第________组结果对得到的结论起到了关键作用,但需把它与第________组和第________组的结果进行比较,才能说明DNA分子的复制方式是________。
(3)分析讨论:
①若子Ⅰ代DNA的离心结果为“轻”和“重”两条密度带,则“重带”DNA来自于________,据此可判断DNA分子的复制方式不是________复制。
②若将子Ⅰ代DNA分子双链分开后再离心,其结果是________(填“能”或“不能”)判断DNA的复制方式。
③若在同等条件下将子Ⅱ代继续培养,子n代DNA离心的结果是:密度带的数量和位置是________,放射性强度发生变化的是________带。
④若某次实验的结果中,子Ⅰ代DNA的“中带”比以往实验结果的“中带”略宽,可能的原因是新合成的DNA单链中的N尚有少部分为________。
【思路点拨】 半保留复制实验是利用15N标记的DNA分子放在含14N的培养基中进行实验,经过分析得出DNA分子复制是半保留的,即每个新形成的DNA分子中,一条链来自亲代DNA分子的母链,另一条是新形成的子链。
【解析】 (1)要得到DNA中的N全部被放射性标记的大肠杆菌B,必须经过多代培养,并且培养液中15NH4Cl是唯一氮源。(2)从图表看,证明DNA分子的复制方式是半保留复制,第3组实验结果起到了关键作用,因为其离心后仅为中带(15N/14N);作为对照,还需与第1组和第2组的结果进行比较。(3)亲代DNA为15N/15N,原料为14N,离心的结果为“轻”(14N/14N)和“重”(15N/15N),则“重带”DNA来自于亲代DNA,即B,这种复制方式没有发生母链与子链的重新组合,因而不是半保留复制;
②判断DNA的复制方式主要是看子代DNA与亲代DNA的关系,实质是母链与子链是否发生重新组合,若将DNA双链分开离心,则不能判断DNA的复制方式;③在同等条件下,将子Ⅱ代继续培养(原料为14N),密度带为两种,即轻带(14N/14N)和中带(15N/14N),位置未发生变化,其中随着n的增加,轻带的数量会逐渐增加,而中带不变,因而放射性强度发生变化的是轻带;④若某次实验结果中子Ⅰ代DNA的“中带”(15N/14N)比以往实验结果略宽,说明该实验结果中的“中带”不完全是15N/14N,有可能新形成的子链(14N)中混有少量的15N。
【答案】 (1)多 15N(或15NH4Cl) (2)3 1 2 半保留复制 (3)①B 半保留 ②不能 ③没有变化 轻 ④15N
[专题强化]
1.用同位素标记技术追踪研究物质的转移变化途径是生物科学研究的重要手段之一。下列相关的应用及结果错误的是( )
A.小白鼠吸入18O
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