生物化学 酶工程课件1.ppt

第二章?????酶 Enzyme;常用网址;1. 了解酶的化学本质、催化特点，分类及命名 3. 掌握酶原激活的概念，高效的机理 4. 掌握酶米氏方程、温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响，掌握三种可逆抑制作用的动力学特点 5. 了解多酶体系、别构酶、共价调节酶、同工酶、固定化酶的概念 6. 熟知酶分离提纯的一般方法，酶活力、比活力的概念及其测定方法;酶与底物分子结合; 1857年，Pasteur提出酒精发酵是酵母细胞活动 的结果 1897年，Buchner兄弟证明发酵与细胞的活动无 关，不含活细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵 1913年， Michaelis和Menten提出米氏学说－酶 促动力学原理 1926年， Sumner首次从刀豆中提出脲酶结晶， 并证明具有蛋白质性质; 1969年，化学合成核糖核酸酶 1967-1970年， 从E.coli中发现第I、第II类限 制性核酸内切酶 1986年， Cech发现核酶－具有催化功能的 RNA（Ribozyme）; 第一节?? 酶学概论 一、概念 1.酶的生物学意义（大肠杆菌生命周期30分钟） 酶使得生物体内化学反应容易和迅速 限制性核酸内切酶（限制-修饰） 2.酶是一种生物催化剂 生物催化剂 ：酶 enzyme 核酶 ribozyme ;3. Ribozyme（具有催化功能的RNA） 1980以前，生物催化剂化学本质是蛋白质 80年代初，Thomas Cech和Sidney Altman发 现RNA具有生物催化功能，1989诺贝尔化学奖 ;4. 抗体酶 abzyme（antibody enzyme） 又称催化性抗体（catalytic antibody） 是一种具有催化功能的抗体分子 过渡态理论：酶与底物在过渡态结构互补，亲 和力最强，释放出的结合能使过渡态结合物能级 降低，利于反应物分子越过能垒，加速反应 抗体与抗原是基态结合 ;二、酶催化反应的特点 1.高催化效率 酶催化反应速度是无催化反应的108-1020倍 2.高专一性 酶对反应的底物和产物都有极高的专一性 几乎没有副反应发生 3.反应条件温和 温度低于100℃，正常大气压，中性pH环境 ;4.活性可调节 别构调节、酶的共价修饰、酶的合成、活化与 降解等 5.有辅酶、辅基、金属离子参与 ;;;;;;;三、酶的化学本质 经典概念：酶是具有催化功能的蛋白质 1.酶的组成 仅由蛋白质组成的酶：脲酶、溶菌酶、淀粉 酶、脂肪酶、核糖核酸酶等 酶蛋白+辅助因子（全酶）：超氧化物歧化 酶（Cu2+、Zn2+）、乳酸脱氢酶（NAD+） 酶的专一性由酶蛋白的结构决定，辅助因子 决定反应类型（传递电子或某些化学基团）;2.酶的辅助因子 主要有金属离子（Fe2+、Fe3+ 、Cu+、Cu2+、 Mn2+、、Mn3+、Zn2+、Mg2+ 、K+、 Na+ 、Mo6+ 、 Co2+等）和有机化合物 辅酶：与酶蛋白结合较松，可透析除去 辅基：与酶蛋白结合较紧;; 酶 辅助因子 CuZn-SOD Cu2+ Zn2+ Mn-SOD Mn2+ 过氧化物酶 Fe2+或Fe3+ II型限制性核酸内切酶 Mg2+ 羧肽酶 Zn2+ ?; 酶蛋白决定酶专一性，辅助因子决定酶促反 应的类型和反应的性质 NAD+构成各种专一性强的乳酸脱氢酶、醇脱 氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶 生物体内酶种类很多，辅助因子种类很少， 一种辅助因子可与多种酶蛋白结合;四、酶按照亚基组成及结构特点分类 单体酶、寡聚酶、多酶复合体 1.单体酶 由一条或多条共价相连的肽链组成的酶 牛胰RNase 124 单链 鸡卵清溶菌酶 129 单链 胰凝乳蛋白酶 三条肽链 单体酶种类较少，一般催化水解反应;2.寡聚酶