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毕赤酵母中外源表达脂肪酰-CoA还原酶生产脂肪醇

微生物学通报 Jun. 20, 2016, 43(6): 1181?1189 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150376 研究报告 毕赤酵母中外源表达脂肪酰-CoA 还原酶生产脂肪醇 陆健开1 刘毅1 郭道义1 邓子新1,2 刘天罡1,2* (1. 武汉大学药学院 组合生物合成与新药发现教育部重点实验室 湖北 武汉 430071) (2. 湖北省合成微生物技术工程实验室 武汉生物技术研究院 湖北 武汉 430075) 摘 要:【目的】通过在毕赤酵母 Komagataella pastoris GS115 中外源表达来源于霍霍巴 [Simmondsia chinensis (Jojoba)]的脂肪酰-CoA 还原酶 Jojoba FAR,利用微生物发酵生产脂肪醇。 【方法】以质粒 pRL105 为模板 PCR 扩增获得霍霍巴脂肪酰-CoA 还原酶的编码基因,以 pGAPZαA 为载体构建重组表达质粒 pGAP-far,并通过电转化法转入 K. pastoris GS115,筛选转化子并发酵, 气相色谱-质谱联用检测发酵产物。【结果】构建了毕赤酵母重组菌株 pGAPZ-far-GS115,通过摇 瓶发酵检测到脂肪醇的合成。随后在 7 L 规模的发酵罐上发酵验证,得到脂肪醇产量为 134.74 mg/L, 产率为 1.22 mg/(L·h)。【结论】实现了脂肪醇在毕赤酵母中的生物合成,为工业上利用毕赤酵母 生产脂肪醇奠定了一定基础。 关键词:脂肪酰-CoA 还原酶,毕赤酵母,生物发酵,脂肪醇 Production of fatty alcohol in Komagataella pastoris by heterologous expression of fatty acyl-CoA reductase LU Jian-Kai1 LIU Yi1 GUO Dao-Yi1 DENG Zi-Xin1,2 LIU Tian-Gang1,2* (1. Key Laboratory of Combinatorial Biosynthesis and Drug Discovery, Ministry of Education, Wuhan University, School of Pharmaceutical Sciences, Wuhan, Hubei 430071, China) (2. Hubei Engineering Laboratory for Synthetic Microbiology, Wuhan Institute of Biotechnology, Wuhan, Hubei 430075, China) Abstract: [Objective] We selected Simmondsia chinensis (Jojoba) fatty acyl-CoA reductase Jojoba FAR for heterologous expression in Komagataella pastoris strain GS115 to produce fatty

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