胚胎干细胞 与胚胎工程 - 生物探索-探索生物科技价值的新 ….pptVIP

胚胎干细胞 与组织工程;胚胎干细胞的定义; 一、胚胎干细胞研究进展; ; ;二、ES细胞生物学特性;(二）ES细胞的形态; （三）ES细胞的核型 （四）ES细胞呈现高的端粒酶表达活性 ;（五）人ES细胞具有表达早期胚胎表面抗原（SSEA，stage-specific embryonic antigen）的特性;（六）ES细胞的体内分化 1、在免疫缺陷小鼠体内分化 三胚层结构或畸胎瘤 2、将ES细胞注入囊胚中可以形成形成嵌合体动物 1984年bradly 获得了注射ES细胞的嵌合体鼠;（七）ES细胞的分化潜能;1、造血细胞 ES细胞的拟胚体在体外可分化为卵黄囊血岛样结构分化产生红细胞、髓细胞和淋巴细胞。ES细胞分化为造血细胞是可重复和高效的，除血清外不需其它因子，类似于胚胎发育过程。;2、内皮细胞和血管 ;3、心肌和肌细胞 拟胚体在一定条件下培养数天可产生自动收缩的心肌细胞 二甲基亚砜和肌肉专一性调节因子MyoD转染ES细胞结合可诱导ES细胞分化为骨骼肌，并形成肌管。;4、神经细胞 维甲酸可提高贴壁培养的ES细胞转化神经细胞，并表达特异蛋白-nestin,并在实验中用来作供体移植入Huntingson’s疾病模型大鼠体内，可治疗该种疾病。; 5、脂肪细胞和软骨细胞 ES细胞在二甲基亚砜、胰岛素和三碘甲腺原酸的联合作用下可分化为脂肪细胞；的塞米松可诱导携带ROSA-geo基因的ES细胞转化为软骨细胞。 ;三、ES细胞的来源;（二）人胚胎干细胞来源 1、利用人工授精遗留的胚胎或流产的胎儿。 2、将人的成熟的细胞核和移入人卵细胞培养至囊胚期分离ES细胞 3、将人的细胞核移入其它动物卵细胞以获得ES细胞 4、将人的细胞核移入ES细胞内利用ES细胞的胞浆诱导表达ES特异基因 ;四、ES细胞的培养;五、ES细胞的开发和利用;（二）人ES细胞开发和利用方向 1、用人ES细胞研究人类自身胚胎发育过程及组织功能研究 2、寻找调节胚胎细胞定向分化的关键因子诱导ES细胞定向分化 3、利用胚胎干细胞成功地构建新药筛选模型。 ;3、临床应用 用ES细胞作为组织移植的供体是具有诱惑力的设想，临床上首选的治疗目标是神经退行性病变、糖尿病、脊髓损伤及造血系统疾病。为了实现成功的移植，人们必须获得足够的干细胞，也就是治疗性克隆并且设法克服移植后的排斥反应，其可能的途径如下：;（1）建立广泛的ES细胞库，提供多个主要组织相容性抗原位点以供MHC相配合； （2）建立普遍适用的供者细胞系在这些细胞系中对MHC基因进行遗传学修饰； （3）用同源重组的方法将受体的MHC基因转入ES细胞； （4）直接把受体细胞的细胞核移入ES细胞中，子代细胞将全部含有MHC基因;有关的伦理学问题; 组织工程;人工脏器和脏器移植的难处;一、 组织工程的定义 组织工程最初是由Reddi于1994年提出的，是应用工程技术和生命科学的原理和方法来解释生理和病理状态下哺乳动物的组织结构与功能之间的关系，研究生物替代物，以恢复、维持或改进组织功能的一门新兴学科。 ;组织工程包括三个组成部分： 一、是提供细胞附着的细胞外间质； 二、是提供细胞的应答信号； 三、是触发组织形成的调节信号。; 组织工程的优点 组织工程用少量组织细胞通过体外培养扩增，构建新的组织和器官，最终在人体实现无损伤修复和真正意义上的功能重建。这既不是“挖肉补疮”的修复，也不是移植式手术，而是利用人体自身细胞及组织工程的理论和方法，使原先缺损的组织和器官，沿着设计好的支架、模型，再顺其自然长出来。 ? ??? ? 　 ; 二、干细胞是解决难题的关键;三、让机体激活的三件“工具”; 1、细胞：目前用于机体组织再生的细胞与其说是干细胞，不如说是由干细胞略微分化而成的前驱细胞和芽细胞（骨芽细胞等）。能够确保采用患者本身的细胞固然是好事，但是如果不能采用来自患者本身的细胞，就只能采用来自别人的细胞。在这种情况下，就得想办法克服机体的排异反应，比如考虑通过遗传基因重组去除细胞的抗原性。或者采取克隆技术。;2、在构筑机体组织时，必须有成为组织的“构架”和“立脚点”的支持体。在组织工程中，由于把握来自机体本身的细胞外基体是很困难的事，只能代之以人工细胞外基体。作为人工细胞外基体使用的是立体的海绵状骨胶原。由于骨胶原在机体内能被分解，可以随着组织再生被机体全部吸收，人工细胞外基