植物组织培养技术 Plant Tissue Culture.pptVIP

植物组织培养技术;一、实验目的 二、相关知识 三、实验原理 四、试剂和器材 五、操作步骤 六、思考题;一、实验目的;二、相关知识;应用领域 1、快速繁殖 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株。例如一株兰花一年繁殖到400万株。 　　2、种苗脱毒 针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗。 　　3、远缘杂交 利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种。;应用领域 4、突变育种 采用组织培养可以直接诱变和筛选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种。 　　5、基因工程 基因工程主要研究DNA的转导，而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生。 　　6、生物制品 有些极其昂贵的生物制品，如抗癌首选药物--紫杉醇等，可通???组织培养方式生产。;植物组织培养的分类 广义的组织培养依外植体不同，可分为： 1) 器官培养（organ culture） 2)茎尖分生组织培养(shoot tip culture, apical meristem culture) 3)愈伤组织培养(calluse cultrue) 4)细胞培养(cell culture) 5)原生质体培养(protoplast culture); 外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。 愈伤组织(callus)：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。;二、相关知识;二、相关知识;二、相关知识;二、相关知识;二、相关知识;二、相关知识;植物组织培养特点 ①培养条件可以人为控制 ②生长周期短，繁殖率高 ③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 ;植物组织培养营养条件-培养基(Culture Medium) 培养基是植物组织培养的重要基质。 培养基的成分主要可以分水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。; 国际上流行的培养基有几十种，常用的培养基有： MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基、KM-8P培养基;常用培养基简介--MS培养基 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。;常用培养基简介--B5培养基 是1968年由Galmborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。;常用培养基简介--White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。;常用培养基简介—N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。;常用培养基简介—KM-8P培养基 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。;不同营养条件对植物组织培养的影响 ;No BAP;NAA increased to 5.0 mg. l-1 Profuse development of roots over the explant upper and lower surface, and few shoots. Some callus ;植物细胞的全能性;植物细胞全能性的表达;四、试剂和器材;MS培养基配制方法;四、试剂和器材;离体的植物器官、组织、细胞;切开胡萝卜，在圆圈处取一块组织 P-木质部、C-形成层、X-韧皮部;形成层开始形成愈伤组织 C1-愈伤组织、C2-形成层;3-4周后完全形成愈伤组织状态（脱分化） 组织块失去色素;把脱分化后的愈伤组织转移到培养基上